实时活细胞成像分析在3D细胞模型中的应用
类器官是一种能够高度模拟真实器官体内结构、空间形态以及细胞群遗传多样性的体外3D细胞培养物，这些“微型器官”通常来自胚胎干细胞（ESCs）、诱导多能干细胞（iPSCs）、新生儿干细胞、成人干细胞（ASCs）以及患者体内提取的肿瘤组织。从1907年首次证明分离的海绵细胞组织可在体外自我组织分化成完整的生物体，到第一次成功实现成人干细胞建立3D类器官，类器官培养技术不断发展。
相比于2D细胞模型，3D细胞模型能够更真实地反映和模拟体内真实的生理和病理环境。发展至今，类器官在精准医疗、药物发现、再生医学及疾病建模等多个研究领域表现出了巨大的应用潜力。
3D细胞培养与分析面临挑战
包括美国菌种保藏中心（ATCC）在内的多个组织和研究机构发布许多针对多种类器官培养的protocol，定义了其培养条件、接种密度、基质建议和其他关键参数。但是对3D细胞模型的定量分析面临重重挑战，比如：
1、每个孔中类器官形成的重复性无法保证，缺少成熟的实验方案
2、检测和数据通量低
3、费时耗力，需要手动操作获取类器官图像
4、需要借助第三方软件做分析——定量信息有限
5、图像采集过程中的环境控制不到位，导致结果可信度不高
智能、高效的类器官培养与分析技术的进步对于实现快速、准确和全面的成像与分析至关重要。本次在线讲座，来自赛多利斯生物分析部门的产品应用科学家陆叶舟将为大家介绍实时活细胞成像分析在3D细胞模型中的应用。
Incucyte®活细胞成像和分析平台助力复杂肿瘤细胞实时动态研究
目前，很多细胞检测方法仍然采用“终点法”，只能获取单个时间点的结果，而无法了解细胞的动态变化。在此，我们介绍一种活细胞实时成像分析法，可以对培养箱中的细胞生物学进行长期动态监测和自动分析，如免疫细胞对肿瘤细胞的动态杀伤过程，细胞周期的进展，细胞代谢的动态变化等，而避免外界环境因素对细胞检测结果的影响。
凭借Incucyte活细胞分析系统这一强大平台，任何细胞生物学家都可以动态了解所培养细胞的健康状况、形态、运动和功能，以便快速获得新的见解，推动研究进展！赛多利斯新型Incucyte® SX5活细胞分析系统采用独特的光学模块（专利申请中），整合了长波长NIR光源，以减少长期活细胞实验的光毒性。该系统配置多达五个不同的荧光通道，单次实验中可使用多达三个荧光通道和HD相位，从而使科学家获得更多的数据和信息。
在本次网络讲座中，我们将讨论Incucyte®活细胞成像和分析平台是如何迎接当前的挑战，完成复杂的肿瘤细胞实时动态研究，如：
免疫细胞杀伤
细胞周期
细胞代谢
Livecyte-定量非标记活细胞成像及分析系统
Livecyte-定量非标记活细胞成像及分析系统不仅仅可以观察细胞群体在反应过程中的总体变化，其Ptychography（叠层衍射成像）技术也可以定量分析到视野里面每一颗细胞的形态和动态变化。本次网络研讨会中英国Phasefocus公司携手英国赫尔大学(Univerisity of Hull)利用Livecyte研究了原代成纤维细胞划痕的愈合，并且深入分析了在迁移过程中单个细胞本身面积的变化、运动轨迹和迁移速度，从而得到更有说服力的结论。
Livecyte适用于原代肿瘤细胞和干细胞的研究，药物筛选，细胞亚型，有丝分裂，细胞周期，增殖凋亡，细胞迁移，划痕愈合，混合培养，神经分析，血管新生，非标记和荧光标记结合分析。
Livecyte可以为您带来：
1）利用Ptychography技术在无标记、无高光毒性激光照射的情况下，产生无伪影、可定量、高对比度、高保真度的图像。
2）Livecyte可以长时间对细胞进行整体拍摄和录像，并且追踪每个细胞增殖、凋亡和运动的过程。
3）针对单细胞进行形态学和动态学的实时定量监测，分析细胞干质量(Dry mass), 厚度（Thickness）、球形度（Sphericity）、细胞面积(Area)、细胞周长（Perimeter）、分裂指数（Mitotic index）、迁移蜿蜒指数（Meandering index）、瞬时速度(Instantaneous speed) 、方向(Direction) 、位移(Displacement)等。
5）同时非标记的观测，使得细胞可以继续使用直接进入下一步研究，减少多次实验间误差的引入，加速项目进程，降低实验成本。
6）可以做混合细胞培养的研究，得到更接近体内的结果。