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FLuidigm BioMark-陈巍学基因(22)

FLuidigm公司出品的BioMark系统,是一个基于微流控的,高通量的实时定量PCR系统。它可以高效、快速地对多个样本的、多个基因的表达量进行检测,也可以对多个样本的、多个SNP位点进行分型。同时它还可以大量地节约试剂、人工、实验时间。

本视频介绍了BioMark系统的工作原理,和其优势、特点。

2015-08-27 课时:8分钟

秦正红:DRAM1 regulates autophagy FLux and Bid-mediated cell death via lysosomes

秦正红,博士,教授,神经药理专业博士生导师。1994年在美国宾州医学院研究生院获博士学位,先后在美国国家卫生研究院(NIH)及麻省总医院和哈佛大学医学院从事研究工作。2003年从哈佛大学引进,现为苏州大学医学部基础医学与生物科学学院科研中心实验室主任,中国药理学会生化药理学专业委员会委员,中国药理学会神经药理学专业委员会委员,美国神经科学学会会员。

Damage-regulated autophagy modulator1 (DRAM1), a novel TP53 target gene, is an evolutionarily conserved lysosomal protein and plays an essential role in TP53-dependent autophagy activation and apoptosis (Crighton et al, 2006). However, the mechanisms by which DRAM1 promotes autophagy and apoptosis are not clear. 3-Nitropropionic acid (3-NP) is an inhibitor of mitochondrial respiratory complex II. Intrastriatal administration of 3-NP produces neuropathology resemble to Huntington disease. 3-NP-induced neuronal death was involved in autophagy and apoptosis. In vitro studies with 3-NP in TP53 wt and null cells, 3-NP or CCCP increased the protein levels of DRAM1 in a TP53-dependent or independent manner. DRAM1 induction contributed to 3-NP-induced autophagy activation. Knock-down of DRAM1 with siRNA inhibited the activity of V-ATPase, acidification of lysosomes and activation of lysosomal proteases. Knock-down of DRAM1 reduced the clearance of autophagososmes.

3-NP also induced a transcription independent upregulation of BAX protein levels. Knock-down of DRAM1 suppressed the increase in BAX levels. Co-immunoprecipitation and pull-down studies revealed an interaction of DRAM1 and BAX protein. Stably expression of exogenous DRAM1 increased the half-life of BAX. Upregulation of DRAM1 recruited BAX to lysosomes and induced cathepsin B-dependent cleavage of Bid and cytochrome c release. Knockdown of DRAM1, BAX or inhibition of lysosomal enzymes reduced 3-NP-induced cytochrome c release and cell death.

These data suggest that DRAM1 plays important roles in regulating autophagy FLux and apoptosis. DRAM1 promotes autophagy FLux through a mechanism involves activation of V-ATPase and enhances the acidification of lysosomes. DRAM1 promotes apoptosis via a mechanism involving recruitment of BAX to lysosomes to trigger cathepsin B-mediated Bid cleavage.

2015-09-30 课时:39分钟

KrosFLo 中空纤维过滤组件 - 卓越性能,优化澄清、浓缩及纯化工艺

改性聚醚砜(mPES)是一种新型亲水性膜过滤材料,可提供更高的过滤通量,从而缩短过滤时间。与其它膜材质相比,它具有更出色的分离选择性以及更低的蛋白结合率,产品收率更高。mPES中空纤维膜的无缝结构增强了膜的抗张强度,工艺寿命更长。

仕必纯新型改性聚醚砜中空纤维过滤器具有改性聚醚砜的所有性能优势。切向流过滤(TFF)的关键是料液在中空纤维膜表面的循环流动对膜表面带来的清洗效果。使用mPES中空纤维过滤器进行切向流过滤,相比膜包或死端过滤器等,优势明显。温和的错流进样可减缓过滤时膜孔堵塞,并可维持较高的过滤通量,保证产品收率。

在细胞治疗领域,切向流过滤可用于慢病毒载体的高倍浓缩以及治疗性细胞的漂洗以及浓缩、换液。

2015-10-28 课时:3分钟

Rescuing US bIomedical Research From Its Systemic FLaws

这些在生物医学研究领域的领导者已经把他们的注意力转向问题这是面临的实践和可持续发展的基础研究美国的企业。他们的关切和想法应对这些挑战已发表在诉讼程序中的美国国家科学院(2014年4月22日)。在谈话中,Alberts,Kirschner,蒂尔曼和斯讨论本文的成因,需要关注的核心问题,以及需要涉及更大的科学社区在保障活力的过程中生物医学研究企业。

2016-09-26 课时:13分钟

掌控Phospho-FLow: 巧用细胞内、外流式细胞术优化免疫细胞活化分析

Since its first use in 1950s, FLow cytometry has become one of the mostly powerful analysis techniques in biomedical research and clinical use to rapidly and simultaneously scrutinize multiple parameters at the single-cell level determined. Besides the use of best possible antibodies, an appropriate fixation and permeabilization protocol play critical roles in achieving successful detections from surface CD markers to intercellular modified targets such as phosphorylated proteins. This presentation, as a guideline, will share with you those important tips that CST FLow-cytometry experts routinely use in their daily bench work. 自从流式细胞术在20世纪50年代首次应用以来,它已成为生物医学研究和临床应用中最有力的分析技术之一,以便在单细胞水平上快速且同时检测多个参数。除了使用经严格验证优化的抗体外,适当的固定和通透方案对于从细胞表面CD marker到细胞内修饰靶标(如磷酸化蛋白)的成功检测起着关键作用。作为指导方针,本次讲座将与您分享CST流式细胞术专家在日常的试验工作中经常使用的经验和技巧。

2018-09-28 课时:21分钟

直击COVID-19 – FLuidigm质谱流式技术应对新冠病毒研究挑战

随着新冠疫情在全球的爆发,人类急需加快对病毒及其相关领域的研究步伐,寻找攻克病毒的方法。FLuidigm独有的质谱流式技术,可在单细胞水平实现五十种以上蛋白标志的同时检测,可以对细胞群体进行更加全面、精细的分型,并深入分析细胞内信号通路,研究细胞因子的表达水平,对于了解病毒感染机制,疫苗研发及治疗方案设定均具有重大意义。本次讲座将为您介绍FLuidigm质谱流式技术的前述优势如何应对新冠病毒研究的各项挑战,助您知己知彼,科学抗疫!

2020-05-08 课时:45分钟

流式(FLow)入通路,蹊径从何寻?

随着流式细胞术近几年的飞速发展,它已成为生物科学领域最有力的分析技术之一。跳出墨守陈规的流式应用,深度挖掘更深层次的流式实验,助力科研及临床的发展,是所有 FLower 为之奋斗的目标。本次讲座将带您了解 Cell Signaling Technology (CST) 流式产品在细胞通路研究中的独到之处,让我们一起在广阔的流式世界中,携手同行,共辟蹊径。

2020-06-09 课时:130分钟