免疫反应的细胞基础 - IrA MellmAn P1
本视频由科普中国和生物医学大讲堂出品
IrA MellmAn (Genentech) PArt 1: CellulAr BAsis of the Immune Response
The immune system is chArged with protecting us from invAding microorgAnisms, A tAsk thAt fAlls to A complex ArrAy of highly speciAlized cell types spreAd throughout the body but thAt must work together As An integrAted system. How they Accomplish And perform their functions cAn be wonderfully understood by probing the bAsic mechAnisms governing their Activities. In the first video, we will consider the overAll orgAnizAtion of the immune response in cellulAr terms, the innAte immune system (comprising evolutionArily Ancient phAgocytic cells thAt recognize conserved molecules of microorgAnisms) And the AdAptive immune system (composed of lymphocytes thAt recognize chemicAlly diverse Antigens).
基因分裂和RNA剪接 - MelissA Moore P1
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MelissA Moore (U. MAss/HHMI) PArt 1: Split Genes And RNA Splicing
In the first pArt of her tAlk, Dr. Moore explAins thAt eukAryotic pre-mRNA contAins long stretches of non-protein coding sequences interspersed with protein coding regions. By recognizing specific sequences, cellulAr mAchinery splices out the non-coding introns leAving just the protein-coding exons in mRNA. Although At first glAnce this mAy seem like A wAsteful process, it is splicing thAt fAcilitAtes the evolution of new genes, And AlternAtive splicing thAt Allows A limited number of genes to produce A lArge number of proteins.
病毒包膜的内吞和渗透作用 - Ari Helenius P2
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Ari Helenius (ETH Zurich) PArt 2: Endocytosis And PenetrAtion
In the second lecture, the next steps in virAl infection Are described. Endocytosis of plAsmA membrAne bound viruses cAn occur viA A number of mechAnisms including cAveolAr, clAthrin, non-clAthrin, or lipid rAft mediAted pAthwAys. The internAlized virus is enclosed in An endosome thAt mAy undergo increAsing AcidificAtion resulting in Acid mediAted fusion between the virAl envelope And the vesicle membrAne. Following membrAne penetrAtion, the virus, once AgAin, mAkes use of cellulAr mAchinery such As microtubules And their motors, to trAnsfer its genome to the nucleus. Helenius describes experiments from his lAb And others thAt hAve deciphered these complex processes.
DNA连接反应
分子生物学中，连接是指通过形成磷酸二酯键将两个DNA片段连起来。连接反应是由一种叫连接酶的酶催化进行的。在细胞内，连接酶用于修复在DNA复制过程中的单链或双链的断裂。在实验室里，DNA连接酶用于分子克隆来连接插入片段和载体-它是宿主生物内复制目的片段的DNA载体分子。
本短片介绍了DNA连接。讲述了连接的基本原理以及准备一个常用的连接反应的逐步步骤，并讨论了连接反应中的关键因素，例如粘末端突出端的长度对反应温度的影响，如何调整DNA插入片段与载体的比例来防止自身连接。还将提及辅助连接的分子生物学工具如Klenow片段和虾的碱性磷酸酶SAP，并讲述连接的应用，例如邻位连接和为测序在片段上添加接头序列。
用SDS-PAGE技术分离蛋白
十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，也称SDS-PAGE，是一种被广泛使用，仅根据分子量大小来分离蛋白质混合物的技术。阴离子去污剂SDS，在变性的线性蛋白表面沿长度均匀分布使其带电。将它们上样到聚丙烯酰胺凝胶后，施加电压，这些表面覆盖SDS的蛋白将被分开。电场作为驱动力，牵引SDS结合的蛋白朝阳极移动，分子量大的蛋白将比小的蛋白移动慢。为了判断蛋白的大小，已知分子量大小的蛋白质标准也会和样品一起上样并在同等条件下跑胶。
本短片介绍SDS-PAGE技术,首先将解释其背后的原理，然后演示每一步的操作过程。视频还将讨论实验中的各种参数，如聚丙烯酰胺浓度，和用于跑胶的电压。还会介绍电泳之后的考马斯亮蓝和银染色方法，以及其他电泳技术，如双向凝胶电泳。
DNA凝胶电泳
DNA凝胶电泳是用来检测和分离DNA分子的一种技术。施加一个电场到由琼脂糖构成的凝胶基质上，凝胶中的带电粒子将根据其大小进行移动和分离。DNA骨架上带负电的磷酸集团会使得DNA片段移向阳极–它是带正电荷的电极。
本视频解释了DNA片段在琼脂糖凝胶上分离的原理，并提供了一个常用的逐步操作过程，包括如何准备琼脂糖凝胶，上样DNA样品，DNA电泳跑胶，观察DNA片段，以及实验完成后正确地处理凝胶和电泳缓冲液。
线虫RNA干扰的简介
RNA干扰是一种应用广泛，将外源双链RNA引入到生物体内从而导致目的基因的表达下调的技术。在线虫中应用RNA干扰技术极为简便高 效，因仅需用表达与目的基因互补双链RNA的大肠杆菌喂食线虫即可实现。
首先，本短片将介绍RNA干扰的概念和解释它如何导致目的基因表达下调。然后我们 将演示在线虫中应用RNA干扰的步骤。包括大肠杆菌和RNAi线虫平板的制备，线虫培养以及如何评估线虫中RNA干扰的效果。RNA干扰经常用于反向遗传 学筛选以揭示哪些基因对于执行特定的生物过程至关重要。另外，自动化反向遗传筛选能使表达下调更高效和并可用于大规模基因分析。最后，RNA干扰经常用于 研究线虫的发育生物学。自它发明以来，科学家利用RNA干扰技术在解释许多生物学现象上取得重大进展。
TAgrisso的伴随诊断 - 陈巍学基因(31)
欢迎来到【陈巍学基因】。我们这个节目，主要是介绍基因组学，和临床分子诊断的最新技术进展。
今天，会和大家谈一谈阿斯利康在开发TAgrisso这个新药过程中对4种伴随诊断方法的研究结果。
TAgrisso是阿斯利康公司开发的一个针对EGFR基因有耐药突变的晚期非小细胞肺癌者的药物，是酪氨酸激酶抑制剂类的靶向抗癌药物。
TAgrisso可以选择性地抑制突变型的EGFR，对发生耐药的肿瘤有强抑制作用；而对野生型的EGFR的抑制作用较弱，即对身体正常表皮细胞的生长抑制作用较弱。
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抗原提呈和树突状细胞 - IrA MellmAn PArt 2
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早在100多年前，科学家就已经发现，免疫反应是由先天性和适应性免疫两个系统构成。而负责连接这两部分免疫反应的细胞类型，是最近才发现的树突状细胞。树突状细胞具有检测保守微生物产物的能力，可以激活细胞的先天免疫反应，并捕捉到广泛多样的微生物抗原抗体，也可以激活适应性免疫反应。抗原提呈和树突状细胞的独特能力，反映了细胞生物学的一系列显著的特化作用。
IrA MellmAn (Genentech) PArt 2: Antigen PresentAtion And Dendritic Cells
The immune response integrAtes two distinct systems of innAte And AdAptive immunity discovered over 100 yeArs Ago. Linking these two Arms of the immune response is the tAsk of A compArAtively recently identified cell type, the dendritic cell. Dendritic cells hAve the cApAcity to detect the conserved microbiAl products thAt ActivAte cells of the innAte immune response And cApture the drAmAticAlly wider diversity of microbiAl Antigens to prime Antibody And T cell responses chArActeristic of AdAptive immunity. The unique cApAcity of dendritic cells for Antigen processing And presentAtion reflects A series of remArkAble speciAlizAtions of bAsic principles of cell biology.
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剪接体的结构和动力学 - MelissA Moore PArt 2
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本节课MelissA Moore讲述了，剪接体的成分和在每个工作周期中的剪接体。穆尔还解释了如何利用荧光蛋白标签和全反射显微镜的创新，使她和她的同事们能够更好地理解复接机器的有序组装与功能。
MelissA Moore (U. MAss/HHMI) PArt 2: Spliceosome Structure And DynAmics
Moore goes on to describe the cellulAr splicing mAchine, the spliceosome, in greAter detAil in PArt 2. She lists the components of the spliceosome And where eAch works in the spliceosome cycle. Moore Also explAins how the innovAtive use of fluorescent protein tAgs And totAl internAl reflection microscopy hAs Allowed her And her colleAgues to better understAnd the ordered Assembly And function of the complex splicing mAchine.
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