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常用药品试剂和培养基的配制——培养液和培养基
作者:佚名    实验频道来源:    点击数:    更新时间:2004-6-16

(四)培养液 ,培养基

1、人造海水

配方一  

氯化钠( )                       24.72

氯化钾(                        0.67

氯化钙(                1.36

氯化镁(                4.66

硫酸镁(                6.29

碳酸氢钠(                   0.18

蒸馏水                                加到1

把上述各种盐溶解在少量蒸馏水中,再加入碳酸氢钠,最后用蒸馏水稀释到1000毫升。

配方二  

氯化钠    45.0                    硫酸镁    0.1

氯化镁    5.0                     氯化铁(1%溶液)    1

先把硫酸镁、磷酸一氢钾、氯化铁用少量蒸馏水溶解,加蒸馏水到980毫升。随后取硝酸钙溶解在20毫升蒸馏水里,把此溶液逐滴加到上述溶液内,装瓶保存。

配方二    克诺普氏(Knop’s)溶液

硝酸钾    1                       硫酸镁    1

磷酸二氢钾    1                   硝酸钙    3

先把硝酸钾、硫酸镁、磷酸二氢钾用少量蒸馏水溶解,加蒸馏水到980毫升。随后取硝酸钙,用20毫升蒸馏水溶解,加入到上述溶液内。溶液灰形成白色沉淀,在使用是必须摇动。

在以上溶液中加入蔗糖溶液(14%),能刺激某些藻类形成游动孢子。该液用于培养绿藻。

3、植物无土培养液

配方    霍格伦德(Hoagland)和斯纳德(Snyder)液

硝酸钙     0.821                 硝酸钾    0.506

磷酸二氢钾 0.136                 硫酸镁    0.120

酒石酸铁   0.005

把上述盐类溶解在少量蒸馏水里,然后稀释到1000毫升。

 

(五)培养基

1、细菌培养基

配方一    牛肉膏琼脂培养基

牛肉膏    0.3                    蛋白胨    1.0

氯化钠    0.5                    琼脂      1.5

        1000毫升

在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。

配方二    马铃薯培养基

取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。

配方四    根瘤菌培养基

葡萄糖    10                     磷酸氢二钾               0.5

碳酸钙     3                     硫酸镁(   0.2

酵母   0.4                     琼脂                      20

    1000毫升                     1%结晶紫溶液              1毫升

先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。

2、放线菌培养基

配方一    淀粉琼脂培养基(高氏培养基)

可溶性淀粉    2                 硝酸钾      0.1

磷酸氢二钾    0.05              氯化钠      0.05

硫酸镁        0.05              硫酸亚铁    0.001

琼脂          2                          1000毫升

先把淀粉放在烧杯里,用5毫升水调成糊状后,倒入95毫升水,搅匀后加入其他药品,使它溶解。在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。调整pH值到7.27.4,分装后灭菌,备用。

配方二    面粉琼脂培养基

面粉    60                      琼脂    20

      1000毫升

把面粉用水调成糊状,加水到500毫升,放在文火上煮30分钟。另取500毫升水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整pH值到7.4,分装,灭菌,备用。

3、真菌培养基

配方一    萨市(Sabouraud’s)培养基

蛋白胨    10                   琼脂     20

麦芽糖    40                       1000毫升

先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。

本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。

配方二    马铃薯糖琼脂培养基

把马铃薯洗净去皮,取200克切成小块,加水1000毫升,煮沸半小时后,补足水分。在滤液中加入10克琼脂,煮沸溶解后加糖20克(用于培养霉菌的加入蔗糖,用于培养酵母菌的加入葡萄糖),补足水分,分装,灭菌,备用。

把这培养基的pH值调到7.27.4,配方中的糖,如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。

配方三    黄豆芽汁培养基

黄豆芽     100                     琼脂    15

葡萄糖      20                        1000毫升

洗净黄豆芽,加水煮沸30分钟。用纱布过滤,滤液中加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌使它溶解,补足水分到1000毫升,分装,灭菌,备用。

把这培养基的pH值调到7.27.4,可用来培养细菌和放线菌。

配方四    豌豆琼脂培养基

豌豆     80                       琼脂     5

     200毫升

80粒干豌豆加水,煮沸1小时,用纱布过滤后,在滤液中加入琼脂,煮沸到溶解,分装,灭菌,备用。

4、食用菌菌种培养基

配方一    马铃薯蔗糖--琼脂培养基

20%马铃薯煮汁     1000毫升

蔗糖    20                       琼脂      18

把马铃薯洗净去皮后,切成小块。称取马铃薯小块200克,加水1000毫升,煮沸20分钟后,过滤。在滤汁中补足水分到1000毫升,即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,补足水分,分装,灭菌,备用。使用该培养基对pH值要求不严格,可以不测定。

配方二    综合马铃薯培养基

20%马铃薯煮汁     1000毫升

磷酸二氢钾     3                硫酸镁     1.5

葡萄糖        20                维生素      10毫克

琼脂          18

先配制20%马铃薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各种组分,加热溶解后补足水分,调整pH值到6。分装,灭菌,备用。

该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。

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