图1 CloneMiner™ cDNA文库构建方法  1. 起始mRNA2. 退火的寡聚dT－attB2－Biotin 引物 3. 用SuperScript™ II逆转录酶合成第一链和第二链cDNA 4. 连接attB1接头 5. 加上接头的cDNA和pDONR™222载体混合在BP Clonase™酶存在时构建入门文库 6. 得到的入门克隆有attL位点；产生的副产物是自由的ccdB基因 7. 转化E.coli并选择抗卡那霉素的克隆    获得全长的完整的克隆 传统的克隆方法需要使用限制酶来改变您的cDNA末端，以适合克隆载体，这存在一种风险，即您的基因可能被同样的酶切成几段。通过使用GateWay®技术来替代限制酶，CloneMiner™试剂盒避免了这种风险。没有任何克隆暴露在限制酶中，所以提供了最佳的克隆代表性和100％的全长的完成cDNA（图2） 选择筛选方法 CloneMiner™ cDNA文库可以使用任何量的技术来筛选分离特定的DNA信息，包括传统的方法如探针筛选或PCR扩增。另外，整个文库都可以转到表达载体上以进行表达克隆和功能分析。因为CloneMiner™ cDNA文库构建试剂盒整合了GateWay技术，所以您可以迅速地切换到各种表达系统中去。 满足您所需 为了使您的文库构建更加方便，CloneMiner™ cDNA文库构建试剂盒包含了您需要的各种试剂（表1）。您不用再去查找其他试剂。所需要准备的就是您的实验材料。  超乎寻常的技术得到最高质量的文库 使用CloneMiner™ cDNA文库构建试剂盒，您可以以一种前所未有的方法检测到低丰度的和新的基因，要找到您的基因吗？请致电我们马上订购Invitrogen产品。 很容易转化到其它表达系统中 采用Gateway®技术，你能够很容易将目的基因转化到其它的系统中，包括哺乳动物，昆虫，酵母和大肠杆菌来进行进一步的研究－不需要进行亚克隆（图3）。存在于每个Gateway®入门和目的载体上att位点之间简单的重组反应使你能够广泛选择各种表达系统。如需进一步了解Gateway®技术，请参考我们的技术文章——使用Gateway®技术进行克隆和表达，一切皆有可能
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