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免疫组化准备

2007-7-13 21:01:42 信息来源:丁香园论坛 
  •   免疫组化准备
http://www.bioon.com 生 物 谷 网 站最重要的是选择好一抗、二抗或者还有三抗,注意抗体的特异性、效价和交叉反应,最好用单抗。
其他常用试剂有:
1、0.01M(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水(PBS),稀释抗体和洗片子用;
2、清洁液、纯水,洗玻片用
3、多聚赖氨酸处理载玻片,防止脱片
4、固定液:4%多聚甲醛或冷丙酮等;
5、15%~30%蔗糖,组织脱水用;
6、梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋,或者OCT包埋做冰冻切片;
7、抗原修复液:枸橼酸缓冲液(pH6.0);
8、活化剂:EDTA或者Triton X-100;
9、1%~10%牛血清清蛋白(BSA)封闭液;
10、H2O2,灭活内源性过氧化物酶;
11、显色液:根据你做的酶来选择,如果是HRP就用DAB,如果是AKP,就用NBT/BCIP,免疫荧光则不需要;
12、50%缓冲甘油封片液。

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