蛋白质分析——发挥双向电泳技术的威力 2-D electrophoresis－GE Healthcare Bio-Sciences China Ltd (通用电气医疗生物科学中国有限公司)

蛋白质分析——发挥双向电泳技术的威力 2-D electrophoresis

	1，高质量的样品才能得到更好的结果——plus one 样品制备试剂盒
	2，第一向等电聚焦电泳的最佳选择——IPG 干胶条和其缓冲液
	3，专用于第一向等电聚焦电泳的IPGphor
	4，在第二向 SDS－聚丙稀聚丙烯酰胺凝胶电泳中效率最高的Ettan－DALT twelve 系统
	5，高分辨率中等通量垂直电泳系统——Ettan DALTsix
	6,完成凝胶电泳结果的分析——印迹、染色、图像扫描和分析

1，高质量的样品才能得到更好的结果——plus one 样品制备试剂盒

　　安马西亚生物技术公司不断地为双向凝胶电泳的高效分离建立新的标准。安马西亚生物技术公司始终把精力集中在如何获得高重复性、高分辨率和高质量的双向凝胶电泳分离结果上。通过不断的改进，现有的双向电泳产品在节省时间、改善分辨率、增加载量、扩大规模等各方面，都达到了前所未有的水平。

Plusone 2-D Clean-up 试剂盒(2-D Clean-up kit) 用于第一向等电聚焦(IEF)电泳

* 定量沉淀蛋白质、并将干扰物质如去垢剂、盐类、脂类、酚类以及核酸留在溶液里；

* 减少条纹的出现和过度的背景染色；

* 能够使用太脏或太稀的样品；

* 只需90分钟且不会导致点的增多或者减少；

* 每个试剂盒处理50个样品(每个100µl)

Plusone 2－D试剂盒(2－D Quant kit) 用于准确测定在电泳样品缓冲液中蛋白质的含量

* 通过准确的沉淀蛋白质而与干扰物分离

* 线性范围是0-50µg蛋白质

* 耐受8M尿素，2M硫，2％SDS，4％CHAPS，1％DTT，2％两性电解质；

* 60分钟完成定量，每个试剂盒可以做500次实验。

标准曲线：BSA溶于第一向电泳样品缓冲液(8M urea，4%CHAPS, 40mM DTT ,2% Pharmalyte pH3－10中)

标准曲线：BSA溶于水中

Plusone 微型透析试剂盒(Mini Dialysis Kit) 独特设计的离心管可得到最大回收率

* 每个试剂盒处理50个样品

a)带透析膜的盖子，圆锥形的样品管
b)放入样品，旋紧盖子，将管子放在浮漂上
c)倒置管子悬浮于透析液中，磁转子搅拌透析液
d)离心收集样品

Plusone 样品研磨试剂盒(Sample Grinding Kit) 小量细胞和组织快速破碎

* 10分钟左右，每管可处理到100mg的样品；
* 每个试剂盒处理50个样品。

a)在小型研磨离心管中的小团研磨树脂
b)加入样品和提取液，然后用研杵破碎样品
c)离心沉淀细胞残留物及树脂
d)收集上清

2，第一相等电聚焦电泳的最佳选择——IPG 干胶条和其缓冲液

　　有一个很好的第一等电聚焦分离才有可能使蛋白质斑点在第二向电泳里分离得很清晰，尤其是在蛋白质上样量很大时也能分离好。在第一向电泳中使用IPG缓冲液溶胀得固相pH梯度干胶条做等电聚焦分离能获得很好的结果。随着干胶条pH范围和长度的再一次增加，使得用双向电泳分析复杂细胞抽提物这一开发战略目标得以实现。

* 每批产品都有高重复性
* 稳定的pH梯度保持极高的准确性
* IPG缓冲液确保最优化的电泳条件并消除染色背景
* 具有宽、中、窄各种pH范围的最新推出的24厘米长Immobiline™干胶条上样量最大，分辨率最高
* 快速筛选或仅对高丰度蛋白质感兴趣时使用较短胶条
* 要观察全部蛋白质的分布，使用pH范围为3－10的胶条
* 为增加在pH5和7之间的分辨率，使用pH3－10非线形梯度胶条，使蛋白质在胶条上分布更均匀
* 获更详细结果可将pH4－7和pH6－11(或pH4－7与pH6－11)胶条组合使用
* 使用窄pH范围(一个pH单位)能更精确研究在这一感兴趣pH范围内的蛋白质

使用pH5.0-6.0的胶条使蛋白质斑点间的距离明显的比用pH3-10的胶条时要大

3，专用于第一相等电聚焦电泳的IPGphor

　　第一向等电聚焦(IEF)电泳分离需要以最高分辨率对目标蛋白群进行分离，以保证在第二向电泳中尽可能多地识别和定量更多的蛋白质。IPGphor是一个完全一体化的电泳系统，它是为快速、简便、高重复性并专用固相pH梯度干胶条电泳而设计的。

一体化的冷却系统和电源精确控制温度和电压，以保证在电泳过程中和每次电泳间的重复性。

每批预制Immobiline干胶条都具有高度的重复性，保证得到可重复的实验结果。

能运行所有规格的Immobiline干胶条：7，11，13，18和24厘米。

使用8000V电源，使聚焦时间最短。

最多可同时走12个干胶条。

4，在第二相SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳中效率最高的Ettan－DALT twelve 系统

　　对于那些要求规模最大，分辨率最高，又不能降低重复性的电泳来说，新的Ettan DALTtwelve系统加上Ettan DALTtwelve预制胶，是最为理想的。Ettan DALTtwelve是目前能提供的使用最大尺寸凝胶和最大容量的电泳系统。

分辨率最高：可用新的24厘米Immobiline干胶条走电泳。

每批预制Immobiline干胶条都具有高度的重复性，保证得到可重复的实验结果。

温度控制精确：一体化的珀尔帖(Peltier)冷却装置。

所设计的电泳槽体积小，缓冲液消耗少。

每次电泳之前具有高重复性：可编程的电源和温度控制。

5，高分辨率中等通量垂直电泳系统——Ettan DALTsix

　　Ettan DALTsix 系统与Ettan DALT预制胶结合，使用最大尺寸的凝胶，可确保高分辨率，且不损失重复性。Ettan DALTsix对于渴望高分辨率，但并不追求通量的用户尤为合适。与电源和循环水浴配合，同时运行6块胶。与现有的多数Ettan DALT配件相匹配。

6,完成凝胶电泳结果的分析——印迹、染色、图像扫描和分析

图像扫描仪(ImageScanner)
ImageScanner™是经过优选的大规模检测电泳凝胶的图像扫描仪。

用于大尺寸胶和多块胶同时染色

Ettan DALT 染色盘

自动染色，适用于单块胶

Hoefer Processor Plus

ImageMaster 2-D Elite软件

* 最优化的斑点检测
* 多种背景消除方法补偿凝胶内的不均匀度
* 全自动匹配比较任何数目的凝胶
* 平均方法用于补偿胶间的误差
* 在用户定义的范围内识别表达水平的差异
* 可以批量处理方式分析双向电泳图像
* 自动将已分析的图像生成网页，便于结果的交流
* 自动链接到多个常用的数据库，方便数据交流

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