硝酸士的宁LD50的测定

一、        毒理学实验方法

1.    急性毒性实验：一次性大剂量给予药物后观察药物的作用；

2.    慢性毒性实验：长期连续多次给予中、小剂量的药物，观察动物一些器官的慢性受损程度；

3.    特殊毒性实验：致癌，致畸，致突变，过敏反应等。

二、        LD₅₀的测定

1.    优点：方法简单易行，所用动物小白鼠价廉易得；

2.    方法

⑴ 简化机率单位法：要求每组动物数相同，每组剂量呈等比关系，数据不能出现倒置；

⑵ bliss法：计算准确

⑶ 改进寇氏法、目测法等。

三、  具体实验

[实验目的]

通过实验了解测定药物LD50的方法和计算过程。

[实验材料]

1. 动物：昆明种小白鼠(体重18-22g，雌雄各半)

2. 器材：注射器、鼠笼、天平

3.    药品：0.008％硝酸士的宁溶液，苦味酸溶液

硝酸士的宁是较强的致惊剂，它为脊髓抑制性神经递质甘氨酸受体的拮抗剂。它的作用快，中毒30min内即可导致动物惊厥，窒息死亡。

[实验方法]

1、预实验：取小白鼠8-10只，以2只为一组，分为4-5组，选择一系列剂量，分别按组腹腔注射士的宁溶液，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起10％和90％死亡率剂量的所在范围。

在预备实验所获得的10％和90％致死量的范围内，选用几个剂量，0.10ml/l0g、0.12ml/l0g、0.14ml/10g，0.17ml/10g、0.20ml/10g、0.24ml/10g (剂量按等比级数排列，剂量间的比例一般用1:0.7-1:0.85)，使一半组数反应率在10-50％，另一半组数反应率在50-90％之间，各组的动物数应相等，一般每组可用10-20只，动物的体重和性别要均匀分配。

2、正式实验

每组取12只小鼠，称重，标记，随机分为6个计量组，每组2只，分别i.p. 0.008％硝酸士的宁0.10ml/l0g、0.12ml/l0g、0.14ml/10g，0.17ml/10g、0.20ml/10g、0.24ml/10g；

3、给药后观察并记录中毒症状，30分钟后记录各组的死亡小鼠数。

[实验结果] 全班结果汇总，计算硝酸士的宁的LD₅₀、LD₅₀的可信限和可信限率。

[计算]

用两个剂量时

=log^-1[ ]

S_LDK = ·

用三个剂量时

=log^-1[ ]

S_LDK = ·

用四个剂量时

=log^-1[ + ]

S_LDK = ·

用五个剂量时

=log^-1[ ]

S_LDK = ·

LD_K的可信限=LD_K±1.96S_LDK   (P =0.95)

             =LD_K±2.58 S_LDK   (P =0.99)

LD_K的可信限率=        (P =0.95)

                  =         (P =0.99)  

X1、X2：剂量的对数，从小剂量到大剂量

P1、P2：各剂量组的动物死亡率

Y1、Y2：各剂量组的动物死亡率转换成机率单位

We：权重系数

W：权重     W = n We（各组动物数×权重系数）

n：各组动物数  N：组数

I：剂量间比值的对数