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细胞凋亡检测:流式细胞仪检测技术

4min

4.5001000r/min离心5min弃去固定液,室温加入含0.2 TweenPBS 1ml37℃孵育15min

5.1ml PBS/FCS3次,每次5min

6.400目的筛网过滤1次。

7.5001000r/min离心5minPBS/FCS,用1.0ml PI染液,4℃避光至少30min。染色在24h之内皆可行,流式细胞仪分析。

 

2)调亡细胞的TUNEL的流式细胞仪分析

1.离心收集细胞,PBS12次。

2.1%多聚甲醛低温下固定15min

3.3ml PBS1次,70%乙醇固定,冰箱内放置13天。

4.PBS轻洗1

5.细胞与TdT标记液37℃孵育,时间12h

6.PBS轻洗1次。

7.细胞在黑暗中37℃与100μl的染色缓冲液孵育30min

8.0.1 Triton-X 100PBS轻洗1次。

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