4.500~1000r/min离心5min弃去固定液,室温加入含0.2% Tween的PBS 1ml,37℃孵育15min。
5.1ml PBS/FCS洗3次,每次5min。
6.400目的筛网过滤1次。
7.500~1000r/min离心5min去PBS/FCS,用1.0ml PI染液,4℃避光至少30min。染色在24h之内皆可行,流式细胞仪分析。
2)调亡细胞的TUNEL的流式细胞仪分析
1.离心收集细胞,PBS洗1~2次。
2.1%多聚甲醛低温下固定15min。
3.3ml PBS洗1次,70%乙醇固定,冰箱内放置1~3天。
4.PBS轻洗1次
5.细胞与TdT标记液37℃孵育,时间1~2h。
6.PBS轻洗1次。
7.细胞在黑暗中37℃与100μl的染色缓冲液孵育30min。
8.含0.1% Triton-X 100的PBS轻洗1次。


