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细胞凋亡检测:生化特征的检测方法

加入终浓度为10μg/ml RNase37℃,30min

8.同法用等体积酚:氯仿:异戊醇抽提,乙醇沉淀,真空抽干。

9.溶液20μlTE缓冲液中,-20保存备用。DNA含量测定:用260nm波长紫外分光光度计:吸光单位为20时约为1mg/ml DNA

 

DNA 5’末端脱磷酸

1.取纯化的细胞DNA 10μg,然后加入:10×CIP 2μl1U),双蒸水加至50μl

2.37℃水浴2h

3.90℃水浴5min以灭活CIP

4.用等体积酚:氯仿:异戊醇抽提,乙醇沉淀,真空抽干。

 

DNA 5’末端32P标记

1.将脱磷酸样品DNA置冰浴上,再加双蒸水10μl10×缓冲液2μlT4多核苷酸激酶10U32P-ATP 740kBq20μCi),双蒸水加至20μl

2.混合后,37℃水浴60min

3.加入1μl0.5mol/L EDTA90℃灭活5min

 

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