3.混匀后稍加离心,室温反应30min。
4.加1μl 0.5mol EDTA终止反应。
5.常规酚/氯仿/异戊醇抽提1次,无水乙醇沉淀DNA,真空抽干。
6.溶于20μl的TE缓冲液中。
7.取标记DNA在1.8%琼脂糖凝胶上点样,50V电泳约2h。
8.电泳后的凝集置滤纸上烘干,进行放射自显影。
5’末端32P标记法
细胞DNA的提取
1.细胞悬液离心后,沉淀加消化缓冲液0.5ml,50℃ 3~5h,或37℃过夜。
2.用等体积的酚:氯仿:异戊醇抽提细胞裂解液。
3.将水相转移至新的试管,加入150mmol/L乙酸钠和10mmol/L氯化镁。
4.加入2倍体积的预冷无水乙醇,置液氮5min或-20℃ 12h。
5.12 000r/min离心沉淀DNA,70%乙醇洗1次后,真空抽干。
6.溶于20μl的TE缓冲液中。
7.


