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细胞凋亡检测:生化特征的检测方法

收集细胞,1000r/min离心5min,去上清。

2.用冰预冷的70%乙醇固定,可长期保存于-20℃冰箱。

3.1000r/min离心5min,去除固定液,用约0.5mlPBS重悬细胞。

4.转入Eppendorf管中,同法离心,去上清。

5.细胞用40μl PC缓冲液重悬,室温3060min

6.1000r/min离心5min,吸上清于新的Eppendorf管中,真空浓缩15min

7.加入0.25 NP-40溶液3μl1mg/ml RNase A溶液3μl37℃,30min

8.加入3μl蛋白酶K37℃,30min

9.加入12μl样品稀释液,含溴化乙锭的1.5%琼脂糖电泳,观察。

 

2)琼脂糖凝胶电泳的定量检测

简易末端标记法

1.按常规提取细胞DNA

2.0.5mlEP管中加入细胞DNA,反应体系如下:细胞DNA 0.51.0μg10×缓冲液2μl32P-dATP(或-dCTP

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