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酵母遗传学方法11:PCR介导基因破坏法

PCR介导基因破坏法

1.反应混合物:

5μl             10×Taq缓冲液

5μl             25mmol/L MgCl2

2μl             10mmol/L dNTPs

10~100ng         模板DNA

25pmols          引物(每种引物)

0.5μl            Taq DNA聚合酶(2U

2.PCR循环参数:

94          5分钟

94          1分钟

55          1分钟

72          2分钟

10个循环

94          1分钟

65          1分钟

72          2分钟

20个循环

72          10分钟

 

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