酵母活体染色

1）核DNA和线粒体DNA

1．当细胞培养到约10⁷细胞/ml时，离心（5秒）收集细胞，再悬浮在70％乙醇中。

2．固定5分钟或5分钟以上，用水洗2次。

3．将细胞悬浮在含有50ng/ml的4，6-二脒基-2苯基吲哚的封固剂中。1mg/ml的4，6-二脒基-2苯基吲哚母液可在－20℃下贮存。

4．用紫外滤片观察。

2）线粒体

1．在生长培养基中培养细胞达到约10⁷细胞/ml时，加入100ng/ml 3，3’-二已基噁羰花青碘化物（DiOC₆，Sigma D₃₆₅₂或Molecular Probes）用乙醇把1mg/ml母液稀释到1/10⁴。

2．培养5分钟或5分钟以上，用荧光素滤片观察。

3）液泡

1．当细胞生长到约10⁷细胞/ml时，离心收集细胞（5秒），悬浮在含有50mmol/L柠檬酸钠（pH4.0）的YPD中。

2．加CDCFDA（羧基-2’,7’-二氯-荧光素双乙酸盐）到终浓度为10μmol/L。

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