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实验室常用技术参数资料(三)

六、常用凝胶的技术参数

  1.葡聚糖凝胶的某些技术数据




种类


干颗粒直径(μ)


分子量分级范围

床体积毫升/克干分子筛


得水值
溶胀最少平衡时间(h)

柱头压力(kPa)(2.5cm直径柱)
肽及球形蛋白质 葡聚糖(线性分子) 室温 沸水浴
Sephadex G-10 40~ 120 ~700 ~700 2~ 3 1.0±0.1 3 1  
Sephadex G-10 40~ 120 ~1500 1500 2.5~3.5 1.5±3.5 3 1  
Sephadex G-25                

粗级

100~300

  (≈5~100目)

             

中级

50~150

  (≈100~200目)

1,000~


5,000
100~


5,000


4~6


1.5±0.2

6

2


细级

20~800(≈200~400目)              

超细

10~40              
Sephadex G-50                

粗级

100~200              

中级

50~150 1,500~ 500~          

细级

20~80 30,000 10,000 9~11 5.0±0.3 6 2

超细

10~40              
Sephadex G-75                
  40~120 3,000~ 1,000~          

超细

10~40 70,000 950,000 12~15 7.5±0.5

24

3

3.92~15.86

Sephadex G-100                
  40~120 4,000~ 1,000~          

超细

10~40 1,500,000 150,000 15~20 10.0±1.0 48 5 2.35~9.41
Sephadex G-150                
  40~120 5,000~ 1,000~ 20~30        

超细

10~40 400,000 150,000 18~22 15.0±1.5 72 5 0.88~3.53
Sephadex G-200                
  40~120 5000~ 1000~ 30~40        
  10~40 800,000 200,000 20~25 20.0±2.0 72 5 0.39~1.57

2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数据

型号

排阻的下限

(分子量)

分级分离范围

(分子量)

膨胀后的床体积(ml/g干凝胶)

膨胀所需最少时间(室温,h)

Bio-gel-P-2 1,600 200~2,000

3.8

2~4

Bio-gel-P-4 3,600 500~4,000

5.8

2~4

Bio-gel-P-6 4,600 1,000~5,000

8.8

2~4

Bio-gel-P-10 10,000 5,000~17,000

12.4

2~4

Bio-gel-P-30 30,000 20,000~50,000

14.9

10~12

Bio-gel-P-60 60,000 30,000~70,000

19.0

10~12

Bio-gel-P-100 100,000 40,000~100,000

19.0

24

Bio-gel-P-150 150,000 50,000~150,000

24.0

24

Bio-gel-P-200 200,000 80,000~200,000

34.0

48

Bio-gel-P-300 300,000 100~400,000

40.0

48

3.琼脂糖凝胶的技术数据

型号

琼脂糖含量

%(W/W)

排阻的下限

(分子量)

分级分离的范围(分子量)

生产厂家

Sepharose 4B 4   0.3×106~3×106 Pharmacia
Sepharose 2B 2   2×106~25×106
Sagavac 10 10 2.5×105 1×104~2.5×105

Seravac
Sagavac 8 8 7×105 2.5×104~7×105
Sagavac 6 6 2×106 5×104~2×106
Sagavac 4 4 15×106 2×105~15×106
Sagavac 2 2 150×106 5×105~15×107
Bio-gel A-0.5M 10 0.5×106 <1×104~0.5×106


Bio-Rad
Bio-gel A-1.5M 8 1.5×106 <1×104~1.5×106
Bio-gel A-5M 6 5×106 1×104~5×106
Bio-gel A-15M 4 15×106 4×104~15×106
Bio-gel A-50M 2 50×106 1×105~50×106
Bio-gel A-150M 1 150×106 1×106~150×106

  4.各处凝胶所允许的最大操作压

凝胶

最大静水压(kPa)

Sephadex

 

G-10

9.8

G-15

9.8

G-25

9.8

G-50

9.8

G-75

4.9

5.琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围

凝胶浓度(%)

线性DNA长度(bp)

0.5

1000~30000

0.7

800~12000

1.0

500~10000

1.2

400~7000

1.5

200~3000

2.0

50~2000

  6.染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度

凝胶浓度(%)

溴酚蓝

二甲苯青FF

5.0

35bp

140bp

6.0

26bp

106bp

8.0

19bp

75bp

10.0

12bp

55bp

20.0

8bp

28bp

7.染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度

凝胶浓度(%)

溴酚蓝

二甲苯青FF

3.5

100bp

460bp

5.0

65bp

260bp

8.0

45bp

160bp

12.0

20bp

70bp

15.0

15bp

50bp

20.0

12bp

45bp

  七、氨基酸的特性

氨基酸名称 三字母缩写 单字母缩写

质量

侧链电离的pHa值

结构式

丙氨酸(alanine) Ala A 89.09  
精氨酸(arginine) Arg R 174.2 12.48  
天冬酰氨(asparagine) Asn N 132.1  
天冬氨酸(aspartic acid) Asp D 133.1 3.86  
半胱氨酸(systeine) Cys C 121.12  
谷氨酰胺(glutamine) Gln Q 146.15  
谷氨酸(glutamic acid) Glu E 147.13 4.25  
甘氨酸(glycine) Gly G 75.07    
组氨酸(histidine) His H 155.16 6.0  
异亮氨酸(isoleucine) lle I 131.17  
亮氨酸(leucine) Leu L 131.17  
赖氨酸(lycine) Lys K 146.19  
甲硫氨酸(methionine) Met M 149.21  
苯丙氨酸(phenylanaline) Phe P 165.19  
脯氨酸(proline) Pro P 115.13  
丝氨酸(serine) Ser S 105.06  
苏氨酸(threonine) Thr T 119.12  
色氨酸(tryptophan) Trp W 204.22    
酪氨酸(tyrosine) Tyr Y 181.19 10.07  
缬氨酸(valine) Val P 117.15  

  八、遗传密码

密码子的第二位

密码子的第一位(5’端)  

U

C

A

G

  密码子的第三位(3端’)

U
UUU Phe UCU Ser UAU Tyr UGU Gys U
UUC Phe UCC Ser UAC Tyr UGG Gys C
UUA Leu UCA Ser UAA 终止(赭石) UGA 终止(乳白) A
UUG Leu UGG Ser UAG 终止(琥珀) UGG Trp G

C
CUU Leu CCU Pro CAU His CGA Arg U
CUC Leu CCC Pro CAC His CGC Arg C
CUA Leu CCA Pro CAA Gln CGA Arg A
CUG Leu CCG Pro CAG Gln CGC Arg G

A
AUU Ile ACU Thr AAU Asn AGU Ser U
AUC Ile ACC Thr AAC Asn AGC Ser C
AUA Ile ACA Thr AAA Lys AGA Arg A
AUG Met ACG Thr AAG Lys AGC Arg G

G
GUU Val GCU Ala GAU Asp GGU Gly U
GUC Val GCC Ala GAC Asp GGC Gly C
GUA Val GCA Ala GAA Glu GGA Gly A
GUG Val GCG Ala GAG Glu GGG Gly G

  九、常用酸碱技术参数

  1.常见的市售酸碱的浓度

溶质 分子式 分子量 mol/L g/L 重量(%) 比重 配制mol/L溶液的加入量(ml/L)
冰乙酸 CH3COOH 60.05 17.40 1045 99.5 1.050 57.5
乙酸   60.05 6.27 376 36 1.045 159.5
甲酸 HCOOH 46.02 23.40 1080 90 1.200 42.7
盐酸 HCl 36.50 11.60 424 36 1.180 86.2
      2.90 105 10 1.050 344.8
硝酸 HNO3 63.02 15.99 1008 71 1.420 62.5
      14.90 938 67 1.400 67.1
      13.30 837 61 1.370 75.2
高氯酸 HclO3 100.50 11.65 1172 70 1.670 85.8
      9.20 923 60 1.540 108.7
磷酸 H2PO4 80.00 18.10 1445 85 1.700 55.2
硫酸 H2P`O4 98.10 18.00 1776 96 1.840 55.6
氢氧化铵 NH4OH 35.00 14.80 251 28 0.898 67.6
氢氧化钾 KOH 56.10 13.50 757 50 1.520 74.1
      1.94 109 10 1.090 515.5
氢氧化钠 NaOH 40.00 19.10 763 50 1.530 52.4
      2.75 111 10 1.110 363.4

  2.各种浓度的酸碱贮存液的近似pH值

溶质 1Na 0.1Na 0.01Na 0.001Na
乙酸 0.40 2.90 3.40 3.90
盐酸 0.10 1.07 2.02 3.01
硫酸 0.30 1.20 2.10  
柠檬酸   2.10 2.60  
氢氧化铵 11.80 11.30 10.80 10.30
氢氧化钠 14.05 13.07 12.12 11.13
碳酸氢钠   8.40    
碳酸钠   11.50 11.00  

  J a.N为光量浓度[1N(1mol/L)×离子价数]。

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