大鼠纹状体细胞增殖实验
1．无菌剪下胚胎13.5～14.5天大鼠的纹状体，置含无钙镁Hanks液的培养皿中。去除脑膜，用无钙镁Hanks液洗涤，钝性梳离单个细胞，不要用胰蛋白酶消化。4℃中离心1000×g 5分钟，去上清液，用含10％小牛血清的DMEM培养液悬浮细胞，计数。
2．将聚鸟氨酸包被的玻片置24孔细胞培养板的孔中，用含10％小牛血清的DMEM培养液稀释细胞，以4.5×104细胞/cm2的密度加入培养孔中。33℃ 5％ CO2饱和水汽二氧化碳培养箱中培养15小时。
3．用无钙镁Hanks液洗涤培养孔2次。加入无血清培养液，5ng/ml bFGF和系列稀释的NGF待测样品或标准品，总体积0.5ml。在33℃ 5％ CO2饱和水汽二氧化碳培养箱中培养2天。
4．更换含同样系列稀释浓度NGF待测样品或标准品的无血清培养液。以后每2天更换一次，继续培养5天。
5．在显微镜下计数每个视野的细胞数。用细胞数对标准品稀释浓度作图，计算待测样品中NGF的浓度。通常50～300ng/ml NGF诱导生长的细胞数呈直线，约200～400个。
