1.取生长良好的B9细胞,用RPMI-1640培养液洗涤细胞5次,完全洗去培养物中的IL-6。取含sIL-6R的样品,系列稀释后与恒定量重组人IL-6反应,同时取系列稀释的IL-6与恒定量sIL-6R反应,37℃ 30分钟。
2.取96孔细胞培养板,每孔加5000个细胞(0.1ml)和0.1ml上述反应液,37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养68小时。每孔加0.5μCi(18.5kBq)[3H]TdR,继续培养5小时。洗涤后测定细胞掺入的[3H]TdR。或用MTT检测法测定增殖细胞数。
3.分析剂量-反应曲线,了解IL-6和sIL-6R的相互作用对细胞生长的影响。


