1．用0.1ml 0.5μg/ml抗sIL-6R的单克隆抗体（0.1mol/L pH9.5的碳酸缓冲液配制）包被96孔酶联检测板4℃ 48小时。用含0.04％ Tween 20的0.5mol/L NaCl溶液洗涤板。加洗涤液（含4％人白蛋白，0.1％ Triton X-100，0.1％明胶的PBS pH7.4）后4℃ 2小时。洗板3次。
2．每孔加50μl含4％正常小鼠血清的洗涤液，50μl系列稀释的待测样品，置4℃过夜。用上述洗涤液洗板3次。
3．每孔加0.1ml用洗涤液稀释到1μg/ml的生物素化兔抗sIL-6R多克隆抗体，置22℃ 2小时。用洗涤液洗板3次。
4．每孔加0.1ml用洗涤液稀释到0.1μg/ml的辣根过氧化物酶标记的抗生物素蛋白，置22℃ 1小时。用洗涤液洗板3次。
5．每孔加0.1ml底物溶液[OPD，用0.1mol/L pH5.0枸橼酸磷酸缓冲液新鲜配制，用前加H2O2到0.015％]。显色后，每孔加0.1ml 2.5mol/L H2SO4溶液终止反应。
6．在492nm处测定OD值，620nm作为参考波长。绘制剂量-反应曲线，判定样品中sIL-6R的含量。
B9细胞生长实验
