2．受体竞争结合实验
1）用洗涤液（含1％人血清白蛋白的RPMI-1640培养液）洗涤培养的B9细胞2次。用含10mmol/L pH4.0枸橼酸溶液处理细胞25秒钟，立即用洗涤液洗涤细胞2次，去上清液。用含0.01％NaN3的洗涤液将细胞配成2×107/ml。
2）取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml细胞悬液和5000cpm[125I]IL-6。
3）取0.4ml的小离心管，每管加0.14ml油[dibutyl phthalate和bis(-2-ethylhexyl)phthalate的3：2混合液（Merck公司），或其它油]，将细胞悬液加到离心管上，离心8000×g 5秒钟。
4）用剪刀剪下沉淀的细胞，在γ计数仪上分别计数沉淀物中结合的IL-6和上清液中游离的IL-6。作图，并计算IL-6与受体的亲和力和sIL-6R或IL-6的竞争结合情况，从而定量sIL-6R或IL-6。
可溶性IL-6受体的ELISA
