IL－6的研究方法

1．取96孔细胞培养板，每孔加1×10⁴ SKW6-C14细胞。再加不同稀释度的标准IL-6或待测样品，总反应体积为0.2ml。

2．在37℃ 5％ CO₂的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养3～4天。每孔取0.1ml培养上清液测定其中IgM的含量。

协同刺激小鼠B细胞分化和产生Ig的活性

1．分离小鼠脾脏B细胞：可用200目的钢丝网分离单个脾细胞，用淋巴细胞分离液分离其中的单个核细胞。再用尼龙毛法或补体依赖的细胞毒方法去除T细胞，用粘附法去除单核巨噬细胞。得到相对纯化的B细胞，用细胞培养液将细胞配成1×10⁶/ml，B细胞的活力应大于90％～95％。

2．协同刺激B细胞分化和产生Ig的活性

1）用PBS悬浮培养的SAC，加入甲醛至终浓度4％，室温中固定细菌10～30分钟。用PBS反复洗涤，洗去甲醛。高压灭菌后分装，4℃保存。用前用无血清洗涤液洗2次。

2）用细胞培养液系列稀释待测样品和标准品。取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml稀释样品，每个稀释度3个复孔。每孔加0.05ml B细胞悬液和0.05ml SAC（终浓度0.02％）。在37℃ 5％ CO₂的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养4～5天。每孔取0.1ml培养上清液测定其中IgG或IgM的含量。

IgG或IgM

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