JID：台学者发现SARS病毒致命蛋白质

生物谷

    生物谷：SARS病毒为何会造成人类致命伤害的谜团被台湾学者解开，台湾阳明大学研究发现，SARS病毒在果子狸身上其实很温驯，人类感染SARS病毒时却变成凶恶病毒，主要关键是病毒中一种特定蛋白质「ORF8a’」会让人类复制病毒能力增加百倍，造成严重并发症死亡。

　阳明大学微生物免疫学研究所教授陈宜民及博士研究员陈嘉燕的这项研究成果，昨天成为国际学术期刊「传染病期刊」(The  Journal  of  Infectious  Diseases)的封面故事。

　阳明大学实验研究的SARS病毒，是由香港SARS死者身上取得，陈宜民表示，透过基因比对3万个样本，发现人类的SARS冠状病毒与果子狸的SARS病毒，最主要的不同就在于掌控病毒复制能力的蛋白质「ORF8a’」。「ORF8a’」进入人体后，会自动删除29个核甘酸，让病毒复制能力提高100倍，并加速患者细胞坏死。

　研究还发现，RNA干扰素能够抑制SARS病毒复制，证明细胞如果有FIRNA干扰「ORF8a’」，致病机率会降低，细胞病变时间也会延后。

    台北消息：非典（SARS）病毒在人类身上造成严重伤害的谜团终于解开，台湾阳明大学研究员陈嘉燕博士发现，非典病毒在果子狸身上其实很温驯，不过人类感染时却会演变成凶恶病毒，主要关键在于病毒中一种特定蛋白质，会让病毒在人身上复制能力增加百倍，造成人类并发重症，甚至死亡。专家表示，这项结果将有助于未来用于治疗非典和癌症的药物研发，这项最新研究报告被国际传染病期刊选为8月1日出刊的最新一期的封面故事。

    2003年的非典风暴，让不少人因此丧命；直到有人推测果子狸是祸首来源时，陈嘉燕便开始进行研究，终于揭开非典的致命原因。陈嘉燕的指导教授、阳明大学微生物免疫学研究所教授陈宜民表示，研究中，通过基因比对，从3万个检体里实验发现，在果子狸身上的非典病毒表现温和，但在人类身上的非典病毒却显得凶猛不少，关键便在于能使得病毒产生复制能力的蛋白质“ORF8a＇”。

　陈宜民进一步解释，“ORF8a＇”只有32个氨基酸，虽然片段小却对细胞有极大影响，不但会造成细胞本身的凋亡，也会促进非典病毒的复制能力，只要有这种蛋白质的存在，冠状病毒复制能力会增加60倍到100倍。

　陈宜民说，此研究对于了解人类非典冠状病毒的致病机转，有很大贡献，如果进一步解开“ORF8a＇”32个氨基酸的结构所含功能的机转，转化蛋白质，未来便可以先研究出成为标靶化疗药物，治疗癌症。

　至于运用在非典的治疗，他说，这项研究，曾将小片段的RNA干扰素进行实验，结果发现能够抑制非典冠状病毒的复制，证明如果有干扰功效，致病机转会降低，细胞病变时间也会延后，因此，未来也可以朝此方向，设计一些治疗方法，进一步研究。

　陈宜民说，这次实验的非典病毒，是由台湾疾管局提供，由香港得非典致死的一个病患身上所分离出来的，因此接触研究此病毒时，必须非常小心严谨，包括防护衣口罩等，都是绝对必需的，实验也必须由两个人互助进行，一不小心就可能会有致命危机。（援引明报）

原始出处:

The Journal of Infectious Diseases 2007;196:405-415

Open Reading Frame 8a of the Human Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus Not Only Promotes Viral Replication but Also Induces Apoptosis

Chia-Yen Chen,1,2 Yueh-Hsin Ping,3 Hsin-Chen Lee,3 Kuan-Hsuan Chen,2 Yuan-Ming Lee,1,4 Yu-Juin Chan,4 Te-Cheng Lien,5 Tjin-Shing Jap,6 Chi-Hung Lin,7 Lung-Sen Kao,8 and Yi-Ming Arthur Chen1,2

1Institute of Public Health, 2AIDS Prevention and Research Center, 3Institute of Pharmacology, National Yang-Ming University; 4Division of Clinical Virology, Department of Pathology and Laboratory Medicine, 5Department of Respiratory Therapy, and 6Section of Biochemistry, Department of Pathology and Laboratory Medicine, Veterans General Hospital; and 7Institute of Microbiology and Immunology and 8Faculty of Life Science, National Yang-Ming University, Taipei, Taiwan, Republic of China

Background.     A unique genomic difference between human and civet severe acute respiratory syndrome coronaviruses (SARS-CoVs) is that the former has a deletion of 29 nucleotides from open reading frame (orf) 8a that results in the generation of orf8a and orf8b. The objectives of the present study were to analyze antibody reactivity to ORF8a in patients with SARS and to elucidate the function of ORF8a.
     Methods.     Western-blot and immunofluorescent antibody assays were used to detect anti-ORF8a antibody. SARS-CoV HKU39849 was used to infect stable clones expressing ORF8a and cells transfected with small interfering RNA (siRNA). The virus loads (VLs) and cytopathic effects (CPEs) were recorded. Confocal microscopy and several mitochondria-related tests were used to study the function of ORF8a.
     Results.     Two (5.4%) of 37 patients with SARS had anti-ORF8a antibodies. The VLs in the stable clones expressing ORF8a were significantly higher than those in control subjects 5 days after infection. siRNA against orf8a significantly reduced VLs and interrupted the CPE. ORF8a was found to be localized in mitochondria, and overexpression resulted in increases in mitochondrial transmembrane potential, reactive oxygen species production, caspase 3 activity, and cellular apoptosis.
     Conclusions.     ORF8a not only enhances viral replication but also induces apoptosis through a mitochondria-dependent pathway.