来自上海交通大学肿瘤研究所，上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室（Key Laboratory of Oncogenes and Related Genes）的研究人员就噬菌体研究方法过程的一个难题提出了解决方法，为噬菌体展示技术，噬菌体基因传递（phage gene delivery）和抗原制备（antigen preparation）等实验手段的改进提供了重要资料。这一研究成果即将公布在12月的《BioTechniques》上。

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领导这一研究的是来自上海交通大学肿瘤研究所，上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室的顾健人院士，这一研究项目得到973项目（no. 2004CB518802）和上海科技基金项目（no. 054119568）的资助。

原文检索：
BioTechniques® December 2006
Volume 41, Number 6
Cell-targeted phagemid particles preparation using Escherichia coli bearing ligand-pIII encoding helper phage genome [Full text]（免费全文）

丝状噬菌体M13、fd和f1是一种在噬菌体展示，噬菌体基因传递和抗原制备等生物技术研究手段中应用广泛的噬菌体——这主要是由于这些噬菌体在增殖期间均不裂解宿主菌，极大地简化了每轮淘选过程之间的中间噬菌体纯化步骤，只用简单的PEG沉淀方法就足以将噬菌体与其他所有污染的细胞蛋白分开。

在之前的研究中，顾教授等人针对噬菌粒（phagemid）介导的基因传递方法报道过改进的辅助噬菌体M13KO7P1（编码12-mer配体多肽和pIII蛋白（pIII fusion））可以用于获得编码兴趣基因的噬菌粒，这种噬菌粒可以展示高水平多肽，而且对于pIII编码蛋白也不是必需的，因此可以给目标基因留下更大的空间。

由于噬菌粒的大小是与克隆的目的基因成比例的，因此当然希望能进一步改进噬菌粒，增大其承载量。但是M13KO7P1辅助噬菌体的得率是比较低的：3.4 × 10⁹ plaque-forming units (pfu)/mL，当辅助噬菌体修饰配体大小中等，比如表皮生长因子EGF，那么得率就很低。为了解决这个难题，顾教授等人通过将EGF修饰辅助噬菌体基因组转入F⁺细菌细胞，获得LMP细胞，这样编码目的基因的噬菌粒就可以转入LMP细胞。