抗肿瘤基因的概念
抗肿瘤基因或阻抑基因最早由A.Knudson Jr.提出，这是指细胞 内一类抑制肿瘤发生的基因，最近又发展为指能对抗肿瘤基因作用 的基因。根据这一概念，在正常细胞中，所谓肿瘤基因和抗肿瘤基 因是两类处于相对抗的基因。在恶性变过程中，一方面是肿瘤基因 的激活，同时有抗肿瘤基因的失活或丢失，造成失去平衡，细胞发 生持续增殖和恶变。
抗肿瘤基因的实验证据
（一）遗传性肿瘤中某些基因的丢失
早在70年代已有证明，某些遗传性肿瘤中染色体的某些位点可发生专一的丢失。 如视网膜母细胞瘤的40％属先天性。这些遗传性病例中（大多为双侧性）的患儿，在 生睛后约5％可见染色体13q14的一个等位基因位点的缺失，尚可能有形态学上不能分 辨的其他缺失。但肿瘤发生时，肿瘤细胞中另一个等位基因也发生了缺失，成为纯合 体。这提示，第一次的缺陷属先天性，第二次属体细胞突变。因为只是两个等位基因 同时缺失时才发生视网膜母细胞瘤，因此这种抗视网膜母细胞瘤形成的基因（Rb）具 有显性的意义。A.Kmudson从这一事实，提出了“两次突变”学说。
根据酯酶D的测定和与染色体13有关的限制性内切片段长并多态性（restrictionfragment length polymorphism， RFLP），证明至少50％的视网膜母细胞瘤细胞中存在纯合体的13q14、20缺失。经治 疗后痊愈的儿童，以后易患肉瘤，而这种瘤细胞中也发现了13号染色体标志位点的缺 失。
另一个相似的例子是肾母细胞瘤（Wilm瘤），在肿瘤细胞中出现纯合子的11q13 的缺失，11p标记位点的缺少还与肝母细胞瘤，小儿横纹肌肉瘤、肾上腺皮须癌有 关。
上述资料提示，正常细胞中存在着具有抑制某些肿瘤发生的某些基因或基因片 段。
（二）正常和恶性细胞杂交中正常细胞染色体对恶性行为的抑制
应用体细胞杂交技术，正常细胞与恶性细胞杂交后所形成的杂体细胞，其恶性程 度降低，但随着正常染色体被逐－排斥，恶性度又恢复。因而，可以分析出具有恶性 行为的基因在哪一条正常染色体上。例如，正常小鼠成纤维细胞和恶性转化细胞杂交 后，抑制恶性生长的基因位于小鼠染色体上4；正常人成纤维细胞与中国仓鼠或金仓 鼠恶性转化细胞杂交时，抑制恶性行为的基因分别位于染色体2或1。但正常人成纤维 细胞和人HeLa细胞杂交时，这种“阻抑基因”位于染色体11及14。因此，不同种属， 不同种类恶性细胞的抗肿瘤基因的种类亦不相同。目前，已有应用DNA转染技术来分 离“抗肿瘤基因”的初步报告，但其意义还有待进一步研究。
（三）抗肿瘤基因的性质和生物学意义
由于对抗肿瘤基因编码的产物尚不了解，所以目前仍难以说明抗肿瘤基因的性质 和确切的生物学功能。R.Sager推测[44]，抗肿瘤基因的产物包括不少抑制细胞生长 的物质，其中有抑素chalone、生长抑制因子（GIF），细胞MHC-I抗原（有助于机体 免疫系统的有效识别）以及基因组维持其遗传稳定性的基因等。所谓抗肿瘤基因可能 包括：
1.编码抑制细胞生长的一些物质。
2.基因表达的调节控制序列，包括trans调节或cis调节的负控制区。
3.调控基因组稳定性的某些基因。
以上仅仅是根据现有材料的一些推测，将有待于实验的证实。
最近有三方面的实验室结果，比较直接提供存在抗瘤基因的证据。
首先是Rb基因的分离。美国哈佛大学、麻省理工学院的小组和加州大学的小组分 别分离出Rb基因的cDNA及其DNA序列分析。这无疑成为抗瘤基因研究的一个重要里程 碑。Friend.S.H.等人用一个定位于13q14、11，以前用于Rb基因限制性内切酶长度多 态性研究的DNA片段H3-8为探针，从人胎盘cDNA文库中筛选出一个4.7kb的cDNA片段， 并同时分离出相应的基因片段的克隆，用上述cDNA为探针，可在正常人的组织DNA中 看到杂交信号，而在部分的视网膜母细胞瘤的DNA中则可看到信号的缺失。如果用 Nouthern吸印杂交的技术来检测正常人某些组织及视网膜母细胞瘤的mRNA，可发现在 前才有4.7kb的信号，而在后者则此mRNA缺失。目前该cDNA的全部DNA序列已经测出。
同时，李文华（W.H.Lee）等人利用酯酶D的基因，通过染色体移步（chromosomal walking），应用 cDNA和单一顺序DNA片段向两侧延伸，终于分离到Rb基因的cDNA及基因片段。此cDNA 长4.6kb，涉及到的基因大于100kb，由27个外显子组成。从cDNA序列分析，预计可翻 译出816个氨基酸组成的多肽。在视网膜母细胞瘤中，不仅可见基因的部分丢失，而 且可看到mRNA转录物的缺失或异常。另一方面，对Wilm瘤的研究也有所突破。Stambri dge等人应用微细胞杂交技术，首次证明了将11号染色体短臂片段导入Wilm瘤细胞， 可使细胞丧失在软琼脂中生长的能力和在裸鼠体内的成瘤能力。但对瘤细胞的形态、 c-myc、N-myc及c-sis的表达均无影响，用其它染色体片段如13号染色体对Wilm瘤的 成瘤能力并无作用。实验结果表明，11号染色体上的抗瘤基因产物与肿瘤形成后期存 在某种联系。
