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第一节:转录:RNA的生物合成——引言

RNA生物合成概念

  0361-1a.jpg (35248 bytes)RNA几乎总是单链的。但几乎每个RNA分子都有许多短的双螺旋部分,称为发夹。这是因为在发夹中,一条RNA链上的两个节段是反平行走向的,可形成碱基对而产生双螺旋区。此外,除了标准的GC和AU对之外,还有较弱的GU对可帮助形成单链RNA的二级结构,一条正在延伸的RNA链的二级结构影响这个RNA分子的剩下部分的转录状况一个细胞中含有许多不同的RNA子,其长度可从小至到50个核苷酸到大至数万个核苷酸不等。这些几乎总是线性单链RNA分分子,极少有环状RNA分子。

  在细胞周期的某一阶段,DNA双链解开成为转录的模板。一切细胞均具有RNA聚合酶。E.coli细胞中约有RNA聚合酶分子3000个以上。此酶催化RNA主链中核苷酸间的3',5'磷酸二酯键的形成。催化反应速度很快,在37℃时RNA链的延伸可达40个核苷酸/秒。但是这种催化作用必须有DNA(作为模板)的存在。RNA的合成一定要非常精确。然而不像DNA那样,转录作用并没有校正(proofreading)机制。但由于细胞RNA不能自我复制,故即使偶有差错亦不会遗传下去。双螺旋DNA分子中仅有一条链可作为RNA的模板。如果说,DNA分子中的两条链均可作为RNA的模板,则每个基因势必将产生两条有互补顺序的RNA。然而遗传学证明每个基因只控制一个蛋白质,故实际上只合成了一条RNA链,或者即使合成两条RNA链,其中也只有一条有功能。事实上,在活体内,只存在着这两条可能RNA链中的一条。在枯草杆菌(Bacillus subtilis)中繁殖的病毒SP8的DNA中,两条互补链的碱基组成截然不同,或者比较容易地分离开来,因而有可能确定活体内的RNA的碱基顺序是否和两条(还是仅和一条)DNA互补。将双链DNA加热到接近100℃以使之变性,再加入用此DNA为模板所合成的单链RNA,再进行退火。结果除复性的DNA双螺旋外,还形成了DNA-RNA杂种分子。实验的结果是很明确的,即仅有一条DNA链被转录。

  如果用RNA聚合酶在体外对DNA双螺旋进行转录,则结果取决于DNA模板受到损伤的程度。例如将T7DNA变性,使RNA聚合酶能与单链DNA结合,则两条均能被转录。但如果用天然的完整双链DNA为模板,则RNA聚合酶仅能和称为启动子的顺序结合,从而只能转录在活体内被转录的那条链。

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