来源
2007-7-4 18:03:00

克隆研究近期四项重大进展

    生物谷综合:近期,国际国内动物克隆研究获得了几项重大研究进展,包括克隆成功人类疾病的动物模型等等,这些成果为人类治疗性克隆的发展产生重要影响。

 

美科学家利用克隆精子繁育大鼠取得成功

    据《自然》杂志7月3日在线报道, 美国康奈尔大学威尔医学院(Weill Medical College)的科学家使用了与克隆整只动物如多利羊相类似的技术。他们将大鼠精子的精头注入去除了DNA的卵细胞,这些“假精子”就开始复制产生一批与原始精子基因完全相同的细胞,随后研究人员利用已经在人类试管受精中广泛使用的技术——单精子卵母细胞浆内显微注射(intracytoplasmic sperm injection),将这些复制细胞注入完整的大鼠卵细胞,并将得到的晶胚植入母鼠子宫,最后得到了13只幼鼠,其中4只成年并且繁育成功。


     该项研究的领导人之一Gianpiero Palermo说:“即使只有三四个样本精子,我们也能得到克隆精子。”但他们同时也承认,这项技术的问题还很多,比如他们一共移植了80个晶胚,只有13个足月产下,其中几只一出生就很快死亡。

     科学家目前尚不清楚这项技术可否用于人类,因为人类的细胞分化要比大鼠复杂得多。Palermo认为,从每个精子最多能够得到8个克隆精子,因为如果这些细胞复制次数超过了3次,精子中的男性特有基因就不再表达。此外,克隆精子呈球形,也就是说没有精尾,不能游动,只能用于体外受精。

    研究人员希望在五年之内能够克隆人类精子。目前大约每300个男性中有一位精子数量趋近于零,如果这项研究取得成功,将为这些男性带来巨大的希望。

     里程碑式成果:克隆猪帮助战胜痴呆症

 

    第一头拥有阿兹海默症(早老型痴呆症)基因的小猪将于今年8月在丹麦出生。这一事件是向着找到这种疾病一种疗法前进中的一个里程碑式的成就。

 

    来自丹麦Copenhagen and Århus大学的科学家再次站在了生物技术的最前端。这一次,他们克隆出了经遗传修饰并能充当阿兹海默症动物模型的小猪。仅在美国就有约500万人罹患这种大脑疾病,而全球的患者数则大约有2400万。

 

    哥本哈根大学医学研究人员经过不懈的努力,已经拥有了创造出人类疾病的转基因猪模型的能力,而这种能力是未来医学研究领域不断前进的一个重要的先决条件。


人类治疗性克隆又向现实迈进一步

 

    人类治疗性克隆又向着现实前进了一步。科学家首次从克隆的猴胚胎中提取出了干细胞。进行这项研究的美国俄勒冈国家灵长类研究中心的研究组成员Don Wolf表示,该成果是人类治疗性克隆基本原则的一个强有力证据。

 

    Wolf的同事Shoukhrat Mitalipov在6月18日在澳大利亚昆士兰举行的国际干细胞研究学会的一个会议上公布了这项突破。

 

    该研究组从278只猕猴卵中分离出染色体,并将它们与从雄性猴子获得的皮肤细胞核放在一起。他们从21个处于胚泡发育阶段的胚胎获得两个干细胞系。

 

    早期的在猴子中的克隆试验在将染色体从卵中移出时使用紫外光作为引导光源。俄勒冈的研究人员人物,这样会破坏胚胎。因此,他们使用偏振光来照亮卵内部。这项技术公布在《Human Reproduction》杂志上。

 

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我国首例荧光克隆猪通过鉴定

 

    东北农业大学培育成功的我国首例体细胞核移绿色荧光蛋白转基因克隆猪日前通过鉴定。  

    去年12月,由东北农业大学刘忠华教授主持的转基因克隆猪课题获得成功。三头绿色荧光蛋白转基因克隆猪在种猪场自然分娩产出,这种转入绿色荧光蛋白基因的转基因克隆猪在紫外光源激发下,口舌、鼻以及四蹄可以观察到明显的绿色荧光,验证了转基因的成功,这是继美国、韩国、日本之后第四例成功通过体细胞核移植方式生产出的绿色荧光蛋白转基因克隆猪。  

        据东北农业大学生命科学学院尹智介绍,时隔半年,这种转基因猪的形体虽然发生了很大变化,但是它们遗传特征还是依然如故:转基因克隆猪的口舌、鼻、蹄在紫外光源激发下明显闪现出绿色荧光。

 

重大突破:灵长类胚胎干细胞克隆成功

    在6月18日举行的第五届国际干细胞生物学学会会议(International Society for Stem Cell Research meeting)上,研究人员报告说利用克隆恒河猴皮肤细胞制出胚

胎干细胞(ES)。

    克隆(Cloning)又称体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer ,SCNT),主要过程是将一个体细胞的细胞核插入一个人工去核的卵子中,重组卵子理论上会发育为一个胚胎,来自这些胚胎的干细胞能够提供与体细胞供体完全匹配的组织移植物,是医学研究中的圣品。目前研究人员已经克隆得到许多物种的后代和ES 细胞。以往从复制的灵长类胚胎获取胚胎干细胞的努力都以失败告终,韩国科学家黄禹锡伪称用人类卵细胞制造胚胎干细胞成功而身败名裂,他用了2000多个人类卵母细胞,还是无法克隆出人类ES细胞系。(ScienceNOW, 28 November 2006)

    美国俄勒冈国家灵长类研究中心胚胎学家Shoukhrat Mitalipov利用改良的SCNT技术取得了成功。Mitalipov对传统方法主要作了两点改进,一是用偏光显微镜(polar microscope)取代DNA染料对卵母细胞的细胞核着色和紫外光观察,他认为后者会破坏重组卵细胞而前者对卵母细胞没有破坏性;二是用直接注射法取代电融合(electrofusion)法将供体上皮细胞的细胞核插入去核卵母细胞,他认为后者有可能过早激活重组卵子,使卵子在染色体未准备好之前开始分裂。

    Mitalipov等在来自一只10岁龄雄性恒河猴身上验证改良策略,获得20枚克隆胚泡,最终得到两个克隆恒河猴ES细胞系。这些细胞系经过了一系列标准检测,证明细胞有无定形分化能力,能够分化为心脏细胞和神经细胞等多种细胞类型。

    “这个工作很漂亮,真的不错,”澳大利亚墨尔本干细胞中心胚胎学家Megan Munsie说。如果能够被其他实验室证实,人类SCNT将为期不远。但仍有一些研究人员心存疑惑,斯坦福大学血液学家Irving Weissman指出,Mitalipov没有检测这些细胞与正常胚胎融合的能力,而这是ES细胞的一个关键特征。Advanced Cell Technology公司克隆专家Robert Lanza说:“许多人怀疑除了用偏光显微镜外,该方法还做了很多其它的改进。”

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