用质谱进行激酶活性分析

生物谷

    芝加哥大学的一项新的研究表明利用固定在一个表面上的肽和质谱能够对激酶活性进行快速、直接的分析。由Dal-Hee Min、Jing Su和Milan Mrksich发明的这个方法避免了传统激酶检测方法的复杂性，即不必使用放射性标记或与抗体结合。

    激酶能够催化特定底物的磷酸化过程。它们还有许多调节功能，因此分析激酶活性对许多研究领域都有重要意义，这其中就包括了药物的创制研究。

    利用基质辅助激光解吸离子化－飞行时间质谱，研究组根据肽的图谱对激酶活性进行了评估。这些肽被固定在一个金片上，并且在它们发生激酶介导的磷酸化反应之前或之后用质谱进行测定。在反应后的谱图中，激酶底物（肽）的质子峰被其产物取代。

    研究人员利用这种方法对六种激酶进行了评估。这种激酶反应将一个磷酸基团加到了底物上。这种方法能对多个激酶活性进行同时的测定，而且还能用于激酶活性抑制的检测。研究人员在文章中也同时报道了用抗癌药物Gleevec抑制激酶Ab1活性的检测结果。

    这项研究的最重要的一个成就是构建了能够同时进行大量酶活性分析的表面，并且酶的活性能够由质谱读出。这种专门设计的底物（肽）简化了质谱分析酶活性的过程并因此使这种技术又向常规应用迈进了一步。