日本血吸虫童虫裂解物对东方田鼠肝脏 T7 噬菌体展示cDNA 文库的筛选及阳性克隆分析

贾人初等

生物工程学报 Chin J Biotech 2008, May 25; 24(5): 733-739

日本血吸虫童虫裂解物对东方田鼠肝脏 T7 噬菌体展示cDNA 文库的筛选及阳性克隆分析

贾人初 , 孙毅 , 刘金明 , 傅志强 , 苑纯秀 , 石耀军 , 陆珂 , 孙焕 , 李浩 , 金亚美 ,林矫矫

1 中国农业科学院上海兽医研究所国家防治动物血吸虫病专业实验室, 农业部动物寄生虫学重点开放实验室, 上海 200232

2 上海师范大学生命与环境科学学院, 上海 200234

摘要: 东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为筛选和分析东方田鼠抗血吸虫抗性相关基因, 以日本血吸虫童虫可溶性裂解物为探针, 筛选东方田鼠肝脏噬菌体展示 cDNA 文库。经三轮筛选, 特异性噬菌体得到有效富集(375 倍)。随机挑取92 个克隆进行序列测定, 获得了 19 条有效 EST 序列。其中 13 个条 EST 序列与已知基因或表达序列标签同源, 6 个 EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性, 为新的表达序列标签。将 19 个 EST 序列的阳性噬菌体克隆和血吸虫童虫共培养, 其中 4 号(GenBank Accession No.: EW968294)、13 号(GenBank Accession No.: EW968303)、14 号(GenBank Accession No.: EW968304)、15 号(GenBank Accession No.: EW968305)、18 号(GenBank Accession No.: EW968308)克隆均诱导了显著的杀虫效果。综合生物信息学分析结果及体外杀伤试验结果, 编码 CASP8 和 FADD 类似性细胞程序性死亡调节蛋白、α-2-HS-糖蛋白、M4 蛋白、具有 R3H 结构域的一种 mRNA 结合蛋白以及三种未知蛋白的编码基因(14、15、18 号克隆)可能是东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因。为进一步研究东方田鼠抗血吸虫机理奠定了基础。

关键词: 日本血吸虫, 东方田鼠, 肝脏, 噬菌体展示 cDNA 文库, 抗性基因

全文下载：日本血吸虫童虫裂解物对东方田鼠肝脏 T7 噬菌体展示cDNA 文库的筛选及阳性克隆分析

更多全文请查看链接：http://journals.im.ac.cn

声明：本文由《微生物学报》授权生物谷 www.bioon.com 网站发布，如需转载请直接与中国科学院微生物研究所期刊联合编辑部联系并支付相应费用，未经授权不得转载，若转载将付相应的法律责任。