新型抑菌蛋白APn5抑制胡萝卜软腐欧文氏菌

韩冬梅，班慧芳，余子全，喻子牛…

微生物学报Acta Microbiologica Sinica

48(9)：1192~1197;4 September 2008

新型抑菌蛋白APn5抑制胡萝卜软腐欧文氏菌

韩冬梅，班慧芳，余子全，喻子牛，孙明*

(华中农业大学生命科学技术学院，农业微生物学国家重点实验室，武汉 430070)

摘要：【目的】魔芋软腐病是一种由胡萝卜软腐欧文氏菌引起的病害，严重影响了魔芋产业的发展。枯草芽胞杆菌BSn5所产生的蛋白APn5对胡萝卜欧文氏菌具有良好的抑菌效果，本文将对该蛋白进行鉴定和性质分析。【方法】用饱和度为30%的硫酸铵沉淀和超滤离心的方法从枯草芽胞杆菌BSn5的发酵上清液中分离纯化APn5蛋白。以滤纸片法检测APn5蛋白的抑菌谱。用不同的温度、pH条件和蛋白酶处理APn5蛋白，并检测其抑菌活性变化。测定菌株BSn5的生长周期，同步检测其发酵上清液的抑菌活性。利用基质协助激光解吸附离子化-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾四极杆飞行时间串联质谱(Q-TOF)分析APn5蛋白。【结果】APn5蛋白对于魔芋软腐病菌具有较好的抑菌活性，抑菌谱较窄，主要对细菌性植物病原菌具有较强的抑制作用；对高温敏感，对蛋白酶E敏感，对蛋白酶K和胰蛋白酶部分敏感；在酸性环境下其抑菌活性稳定，碱性环境下活性不稳定。在菌株BSn5的生长周期中，该蛋白的抑菌活性不能稳定存在，其发酵上清液在对数生长期抑菌活性逐渐升高，进入稳定期后抑菌活性开始下降，直至完全消失。质谱分析未发现其与已知蛋白具有高度相关性。【结论】APn5蛋白具有不同于已报道的枯草芽胞杆菌所产生的抑菌物质的性质，推测为一种新型的抑菌蛋白。

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