斜卧青霉114-2 cbh1基因的TAIL-PCR克隆及与抗阻遏突变株JU-A10的比较

刘自勇,孙宪昀,曲音波

微生物学报Acta Microbiologica Sinica

48(5)：667~671;4 May 2008

斜卧青霉114-2 cbh1基因的TAIL-PCR克隆及与抗阻遏突变株JU-A10的比较

刘自勇,孙宪昀,曲音波*

(山东大学微生物技术国家重点实验室,济南250100)

基金项目:国家自然科学基金(30570049);国家“973项目”(2003CB716006)
*通讯作者。Tel:+86-531-88364429;Fax:＋86-531-8856-5234;E-mail:quyinbo@sdu.edu.cn
作者简介:刘自勇(1983?),男,河北清河人,硕士研究生,研究方向为资源与环境微生物学。E-mail:liuziyong1010@126.com

摘要：

【目的】研究斜卧青霉（Penicillium decumbens）114-2与其抗阻遏突变株JU-A10外切酶基因序列的差异。

【方法】用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)和RT-PCR扩增得到斜卧青霉114-2外切葡聚糖酶Ⅰ(cbh1)基因全长和cDNA全长。

【结果】cbh1基因全长为1500 bp，含有两个内含子，编码453个氨基酸(GenBank,EF397602)。克隆并分析了1.9 kb的cbh1基因上游序列，分别发现了葡萄糖代谢抑制因子CREⅠ维素酶转录调控蛋白ACEΙ的两个的潜在结合位点。

【结论】在相同的培养条件下，其抗阻遏突变株JU-A10的外切酶活明显高于野生株114-2。两菌株的cbh1基因序列完全一致，说明外切酶活明显提高不是由于cbh1基因发生突变引起的。

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