2008-1-29 15:58:51

苏云金芽胞杆菌大质粒pBMB165的克隆与分析

微生物学报 Acta Microbiologica Sinica
48(1)：15~20; 4 January 2008

摘要：以pBeloBAC11为载体,成功构建了苏云金芽胞杆菌YBT-1765的基因组人工染色体(BAC)文库和质粒BAC文库。根据已克隆的包含复制子ori165在内的3.6kb片段中编码复制蛋白Rep165的核苷酸序列设计探针, 通过染色体步移方式, 对质粒文库和基因组文库进行筛选, 得到13个覆盖YBT-1765菌株中质粒pBMB165不同区域的克隆子。通过HindⅢ和BamHⅠ酶切分析, 建立了质粒pBMB165的物理图谱和线状重叠连锁图, 并测算出该质粒的大小为82kb。根据部分核苷酸序列初步统计了pBMB165上转座因子的存在机率。YBT-1765菌株基因组文库的构建和物理图谱的绘制为克隆苏云金芽胞杆菌大质粒提供了一套可行的方案, 成功解决了大质粒难克隆的问题。
关键词：苏云金芽胞杆菌; 大质粒克隆; BAC文库; 物理图谱
中图分类号： Q93, Q78 文献标识码：A 文章编号：0001-6209(2008)01-0015-06

微生物学报 Acta Microbiologica Sinica
48(1)：15~20; 4 January 2008
基金项目: 国家“863 计划”(2006AA02Z174, 20006AA10A212); 国家“973 项目”(2003CB114201)
*通讯作者。Tel: +86-27-87283455; Fax: +86-27-87280670; E-mail: m98sun@mail.hzau.edu.cn
**作者简介: 同等贡献作者。王莉(1981− ), 女, 硕士研究生, 主要从事芽胞杆菌分子生物学研究。E-mail: lwang111@webmail.hzau.edu.cn
收稿日期: 2007-05-08; 修回日期: 2007-06-27
ISSN 0001-6209; CN111995/Q

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