王韵华 陆珺霞 王文虎 任毅 谢毅 黄仲贤
王韵华（复旦大学化学系化学生物学实验室,上海,200433）
陆珺霞（复旦大学化学系化学生物学实验室,上海,200433）
王文虎（复旦大学化学系化学生物学实验室,上海,200433）
任毅（复旦大学化学系化学生物学实验室,上海,200433）
谢毅（复旦大学化学系化学生物学实验室,上海,200433）
黄仲贤（复旦大学化学系化学生物学实验室,上海,200433）
摘 要：为了解细胞色素b5血红素疏水袋中芳香性氨基酸残基和卟啉环之间π-π电子云堆积对蛋白质结构和性质的影响, 用蛋白质工程的定点突变技术, 分别以Tyr和Trp取代Phe58残基. 用UV-vis和荧光光谱研究了F58Y, F58W突变体蛋白盐酸胍诱导的去折叠过程; 研究了突变体蛋白与脱辅基肌红蛋白血红素转移反应的动力学. 结果表明, 用不同的芳香性氨基酸取代Phe58残基, 减弱了血红素辅基与蛋白质肽链之间的结合, 导致蛋白质的热变性中点温度Tm和盐酸胍变性中点浓度Cm下降、血红素转移反应速率增加以及氧化还原电位移动.
关键词：细胞色素b5 定点突变 芳香性残基 辅基-肽链结合 结构稳定性
分类号：Q5 文献标识码：A
