张晓宁 林长发 陈火英 王昊 曲志才 张宏伟 姚剑虹 沈大棱
复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,生物多样性与生态工程教育部重点实验室,上海,200433
摘 要：采用快速扩增cDNA末端(RACE)技术, 获得了盐藻(Dunaliella salina)受诱导表达的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶全长cDNA (DsALDP). 蛋白质序列分析发现, DsALDP与许多植物叶绿体的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(AldP)具有较高的同源性(66%~73%). 系统进化分析进一步证明DsALDP与藻类的AldP亲缘关系最近. 就表达谱而言, DsALDP是NaCl诱导下新表达的转录本, 其表达水平随诱导时间的不同而呈显著变化. 筛选的DsALDP cDNA构建到双元载体pBI121并导入农杆菌用以转化烟草, 对4个T1代转基因植株进行Southern检测, 证明DsALDP已整合入转基因植株的基因组. RT-PCR分析显示DsALDP在这些植株中均得到有效表达. 生物测试表明, T1-1, T1-2和T1-3植株在100~200 mmol/L NaCl下仍保持醛缩酶活性, 且其脯氨酸含量均有不同程度的升高.
关键词：盐藻 NaCl诱导 差异表达 叶绿体果糖-1,6-二磷酸醛缩酶 耐盐性
分类号：Q94 文献标识码：A
