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构建噬菌体展示的β转角多肽文库

李家大  唐为钢  王克夷 
中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海 200031

摘 要:可以形成I型β转角构象的多肽CX2GPX4C融合表达于丝状噬菌体fd的次要衣壳蛋白g3p的N端,从而展示在噬菌体的表面。构建的多肽文库容量达到1.04×108个。随机挑取了19个克隆,序列分析表明,核苷酸和氨基酸的分布与预期的基本一致。19个多肽的疏水性和等电点的综合指标分布广泛。以单克隆抗体12CA5为靶分子,经过3轮筛选,出现明显富集。噬菌体酶联免疫吸附法(ELISA)以及竞争性ELISA的结果表明,从第3轮洗脱液中随机挑选的15个噬菌体克隆都能结合于抗体的抗原结合位点。破坏多肽的构象,这种结合将丧失。

关键词:噬菌体展示肽库;β转角

分类号:Q5,Q2 文献标识码:A

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生物频道录入:生物编辑    责任编辑:生物编辑 


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