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人血管抑素在毕氏酵母中的表达及其活性测定

辛利  徐韧  张倩  李载平  张励  叶勤  甘人宝

 
辛利(中国科学院上海生命科学研究院,生物化学与细胞生物学研究所,上海 200031) 
徐韧(中国科学院上海生命科学研究院,生物化学与细胞生物学研究所,上海 200031) 
张倩(中国科学院上海生命科学研究院,生物化学与细胞生物学研究所,上海 200031) 
李载平(中国科学院上海生命科学研究院,生物化学与细胞生物学研究所,上海 200031) 
张励(华东理工大学生物反应器国家重点实验室,上海 200237) 
叶勤(华东理工大学生物反应器国家重点实验室,上海 200237) 
甘人宝(中国科学院上海生命科学研究院,生物化学与细胞生物学研究所,上海 200031)

摘 要:利用RT-PCR方法从人肝细胞癌HepG2细胞株中扩增得到编码人血管抑素(angiostatin)的cDNA。将其插入毕氏酵母表达载体pPIC9K中,转化毕氏酵母,获得了整合多拷贝血管抑素基因的菌株。发酵液经赖氨酸亲和柱纯化所得到的重组蛋白的产量为25mg/L。蛋白质氨基酸序列分析结果与国外报道一致。重组蛋白特异地抑制bFGF刺激的牛主动脉内皮细胞的增殖,ED50约为3mg/L。

关键词:血管抑素;多拷贝整合;毕氏酵母;抑制;内皮细胞

分类号:Q5,Q2 文献标识码:A

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生物频道录入:生物编辑    责任编辑:生物编辑 


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