仇润祥 朱兴国 刘丽 唐国敏
中国科学院微生物研究所,北京,100080
摘 要：以糖化酶生产菌株黑曲霉T21(Aspergillus niger T21)的糖化酶基因(glaA)5′cis调控区片段为探针, 采用电泳迁移率变动分析(EMSA)法, 从黑曲霉蛋白粗提液中检测到与 glaA 5′调控区特异结合的蛋白因子, 并把其结合DNA 定位在T21 glaA 5′调控区的 -374～-344,-484 ～-414以及-580～-540 bp 3个区段, 且此3个结合DNA的片段在EMSA实验中呈现交叉竞争, 表明这3个DNA区段可与同一个蛋白因子相结合. 以-374～-344 bp序列为探针的紫外交联实验表明, 该蛋白因子的分子量(或亚基分子量)约为10 ku. 利用DNaseⅠ足印分析确定了此蛋白因子在前两个区段的精细结合部位, 并对其结合序列的特性进行了分析.
关键词：黑曲霉糖化酶 电泳迁移率变动分析 蛋白结合因子 DNaseⅠ足印分析
分类号：Q93 文献标识码：A
