李贤慧 陈桂英 窦贺荣 张庆鹏 赵国发 牛云彤 李积胜
武警医学院生物化学与分子生物学教研室,天津,300162
摘 要：神经生长因子(NGF)作用广泛,β-NGF是神经生长因子的活性部分.由于3对二硫键的影响,体外表达NGF很难形成正确折叠的肽链.由于神经系统血脑屏障的存在,大分子肽链的给药途径是一个不可忽视的难题.根据NGF的氨基酸序列及其晶体构象资料,选择CNBr在9位Met处,胰蛋白酶在Arg或Lys处裂解β-NGF.经过Sephadex G-50层析、DE-52纤维素离子交换层析和反相高压液相层析分离纯化后获得NGF活性片段.氨基酸组成分析及氨基酸序列分析结果表明,此片段由16肽GEFSVCDSVSVWVGDK与14肽HWNSYCTTTHTFVK通过1对二硫键连接而成.8日龄鸡胚背根神经节生物活性分析表明,其最佳作用浓度为0.001～0.1μg/L.它的成功分离和鉴定为合成或表达高活性小分子神经营养物质奠定了关键而重要的基础.
关键词：神经生长因子,寡肽,生物活性,神经营养作用
分类号：Q516,Q74 文献标识码：A
