人修饰型降钙素和鼠酰胺化酶基因在昆虫细胞中的偶联表达

杨冠珍,陈珍珍,崔大敷,李伯良,吴祥甫

中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所，上海200031

人降钙素 (hCT)是 32氨基酸的多肽激素 ,C 端为α脯氨酰胺结构 ,具有调节体内钙、磷代谢等许多重要生理功能。用重组昆虫杆状病毒表达系统 ,偶联表达合成的人修饰型降钙素 (hmCT)基因与GST融合基因和大鼠酰胺化酶 (PAM)基因 ,再用抗hmCT或抗PAM抗体 ,既检测到由昆虫细胞表达的GSThmCT产物也检测到PAM产物。经GSH 琼脂糖凝胶亲和层析 ,分离纯化GSThmCT融合蛋白。这种蛋白修饰酶与底物在真核细胞偶联表达也将适用于其他生物活性肽的体外表达 。