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沉淀法分离分析法

  沉淀法也称溶解度法。其纯化生命大分子物质的基本原理是根据各种物质的结构差异性来改变溶液的某些性质,进而导致有效成分的溶解度发生变化。
  1、盐析法
  盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。
  2、有机溶剂沉淀法
  有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、破坏溶质周围形成的水化层,从而降低溶质溶解度;其二、有机溶剂的介电常数比水小,导致溶剂的极性减小。
  3、蛋白质沉淀剂
  蛋白质沉淀剂则仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用,常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。原理:使蛋白质产生变性沉淀。
  4、聚乙二醇沉淀作用
  聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。
  5、选择性沉淀法
  根据各种蛋白质在不同物理化学因子作用下稳定性不同的特点,用适当的选择性沉淀法,即可使杂蛋白变性沉淀,而欲分离的有效成分则存在于溶液中,从而达到纯化有效成分的目的。
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