绿色荧光蛋白基因修饰的人视网膜色素上皮细胞异种移植的长期观察

生物谷

王丰　徐萍　吴继红　夏欣　孙豪龙　许迅　黄倩

　
王丰（上海市第一人民医院中心实验室,上海,200080）　
徐萍（上海市第一人民医院中心实验室,上海,200080）　
吴继红（上海市第一人民医院中心实验室,上海,200080）　
夏欣（上海市第一人民医院中心实验室、眼科,上海,200080）　
孙豪龙（上海市第一人民医院中心实验室、眼科,上海,200080）　
许迅（上海市第一人民医院中心实验室、眼科,上海,200080）　
黄倩（上海市第一人民医院中心实验室,上海,200080）

摘　要：探讨利用视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)细胞移植介导目的基因转移至视网膜的可行性. 人的RPE细胞在体外经携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)基因的逆转录病毒感染及G418筛选后, 手术显微镜直视下经睫状体平坦部注射到兔眼视网膜下间隙. 术后通过活体荧光眼底照相, 荧光显微镜、共聚焦显微镜及透射电镜等观察眼球铺片及切片, 发现经gfp基因修饰的人RPE细胞在兔眼视网膜下间隙可存活一年以上. 移植的RPE-gfp细胞不仅仅局限于移植部位, 大多扩散到超过2～3个象限的眼底, 镶嵌于宿主RPE细胞之间或呈单层排列在宿主色素上皮与神经视网膜之间, 并持续高水平表达GFP. 移植后早期玻璃体内每周注射免疫抑制剂普乐可复(FK506)可明显改善移植细胞的存活状态.

关键词：视网膜色素上皮/眼; 基因/转移/修饰; 移植/异种移植; 绿色荧光蛋白

分类号：R77　文献标识码：A

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