RNA干扰的果蝇Hedgehog途径调控蛋白筛选
就象刺猬一样，以Hedgehog命名的一系列在发育中有重要功能的信号分子还象处在冬眠中的刺猬一样不为人们所认识。Phil Beachy and colleagues在Science上发表的新报道Dlp，CK1等在Hh信号途径中的新功能。
因为传统的遗传学方法对Hh的研究受到Hh在胚胎发育中可能的功能影响而非常局限，Phil Beachy and colleagues用RNA干扰的方法来阻断基因的表达，然后在果蝇的培养细胞中筛选功能性的重要基因。他们用果蝇成虫盘中分离出的细胞转染入Hh途径反应的荧光素酶报道基因和双链干扰RNA。这样的方法主要对内源性的信号分子进行检测，因此对分子真正的内源性活性有很好的了解。研究者发现，对Hh信号途径中的正调控因子如Smoothened (Smo)，Fused (Fu) and Cubitus interruptus (Ci)等用RNA干扰进行抑制表达会这些细胞对Hh敏感度，而对此信号途径的负调控因子Costal 2 (Cos2) and Patched (Ptc)抑制表达则促进这些细胞对Hh的敏感度。
研究者还研究了用果蝇基因组序列预测出可能的激酶和酯酶的cDNA组成的文库进行筛选。他们发现有几种分子对Hh的信号途径有作用。CK1 α以前没有发现对Hh信号传递有作用。还有硫酸甘素糖蛋白，Dlp。以前认为这两种分子在Wingless (Wg)信号途径中有功能，现在研究者报道这两种信号分子都对Hh信号途径有重要的功能。
研究者应用这个新的方法成功的确定了几个对Hh信号途径有重要功能的蛋白，当然对这些蛋白在Hh途径中的准确功能还需要深入的研究。
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Lum, L. et al. Identification of Hedgehog pathway components by RNAi in Drosophila cultured cells. Science 299, 2039-2045 (2003) | Article | PubMed | ChemPort |
FURTHER READING
Ingham, P. W. & McMahon, A. P. Hedgehog signaling in animal development: paradigms and principles. Genes Dev. 15, 3059-3087 (2001) | Article | PubMed | ChemPort |
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