1 实验诊断
汉坦病毒实验诊断方面的研究，主要集中于重组抗原的应用和实验诊断方法的快速、敏感和特异。F.Elgh等采用PUU病毒重组核蛋白作为抗原，与乳胶连接进行乳胶微粒凝集试验，用于汉坦病毒病的快速血清学诊断，与采用PUU病毒重组核蛋白作为抗原的ELISA相比，特异性为90%，敏感性为94%。Jiro Arikawa等将杆状病毒表达的HTN、SEO、PUU病毒核蛋白用于ELISA，至少应用2种重组抗原(HTN和PUU或SEO和PUU)，可以用于汉坦病毒感染的血清学监测。杆状病毒表达N端缺失的HTN或SEO病毒核蛋白作为免疫荧光试验(IFA)的抗原，可以区分HTN与SEO病毒感染。重组核蛋白和N端缺失的核蛋白用于ELISA和IFA，提供了针对汉坦病毒感染的快速、敏感、安全的诊断方法。H.Kallio-Kokko等将杆状病毒表达的PUU病毒核蛋白用于IgG和IgM检测，将大肠杆菌表达的PUU病毒核蛋白用于IgM检测，敏感性达100%，部分表达的核蛋白用于IgG检测，敏感性较低(70%)。他们还报道了在PUU病毒感染的急性病例中，2/3的病例可以采用RT-PCR试验，从病人的血或尿中检出病毒RNA。T.Tomiyama等将高密度正性颗粒包被纯化的汉坦病毒抗原，采用高密度颗粒凝集试验(HDPA)对病毒感染进行快速血清学诊断，对HTN病毒感染的检测有较高的敏感性和特异性，对PUU、SN病毒的感染也有低水平的交叉反应。HDPA与IFA比较，敏感性相近，但比IFA 更为简便快速。W.Irwin等报告了现场调查中免疫印迹试验在鼠类病毒抗体检测中的应用。邱建明等采用5’端生物素标记汉滩病毒特异性寡核苷酸探针，结合磁性分离技术及改进的异硫氰酸胍-酚一步法两种方法提取病毒RNA，进行反转录套式PCR，用于检测临床HFRS病人血清。在7d以内病人血清的阳性检出率为100%，8～14d病人血清的阳性检出率为57.14%，15d后病人血清仍能检测到22.73%阳性。扩增产物经打点杂交检测证实为特异性扩增，这为早期确诊HFRS病人提供了特异、敏感、快速、直接的诊断方法。
2 病毒与宿主动物的基因分析
各国学者采用病毒与宿主的基因分析方法，研究汉坦病毒分离株之间或宿主动物之间亲缘关系的远近，以及病毒与宿主动物的共演化。
2.1 汉坦病毒基因分析 J.W.Song等从韩国绒鼠(Eothenomys regulus)分离了两株PUU相关病毒，命名为Muju(MUJ)病毒。两株病毒G2基因241bp片段序列存在1.2%差异，G2基因241bp片段和S基因208bp片段与PUU病毒相应片段序列的同源性分别为79.5%～83.4%和80.3%～81.2%。L.Yashina等从俄罗斯远东鼠(Clethrionomys)、姬鼠(Apodemus)和HFRS病人分离的HTN病毒，M片段序列同源性86%～89%，从轻型HFRS病人分离的SEO病毒，M片段序列同源性97%。M.Drebot首次报告了加拿大草原田鼠携带PH样病毒。加拿大不同省份SN病毒M、S片段序列存在25%的差异，并且加拿大西部SN病毒株与加拿大东部SN病毒株相比，毒株间基因序列更为接近。Yong-Kyu Chu等报告来源于印尼板齿鼠的病毒株可被SEO型特异引物扩增，M片段290bp序列分析表明与SEO病毒有7%的差异；来源于泰国板齿鼠的病毒株中，2株为SEO病毒，另1株可被HTN型特异引物扩增，M片段290bp序列分析表明与THAI 749毒株有1%的差异。J.W.Song等将来自波兰的TUL病毒与俄罗斯中部和捷克斯洛伐克共和国的TUL病毒比较，核蛋白与G2糖蛋白氨基酸序列同源性大于96%，系统发生分析表明波兰的TUL病毒与俄罗斯中部TUL病毒最为接近，但也存在差异。C.Sibold等的另一项研究——对核蛋白编码基因进行系统发生分析表明，西斯洛伐克TUL病毒与捷克TUL病毒相近，东斯洛伐克TUL病毒与俄罗斯中部TUL病毒相近；而3’-NCR的系统发生分析表明，东斯洛伐克TUL病毒与西斯洛伐克和捷克的TUL病毒相近。作者认为，存在东斯洛伐克TUL病毒从中欧和俄罗斯TUL病毒重组的可能性。
2.2 宿主动物基因分析 多采用细胞色素B基因分析方法。W.C.Black IV等采用微卫星DNA分析确定鹿鼠之间的基因关系，并研究了鼠类窝内汉坦病毒传播的方式。
2.3 病毒与宿主动物的共演化 俄罗斯远东地区南部的7种宿主动物中存在4种汉坦病毒(HTN、PUU、SEO、KBR)。L.Minskaya等的研究表明，从非主要宿主动物分离的病毒与标准株抗原性接近，但在基因分子特征上与从主要宿主动物分离的病毒不同。A.Vaheri等的研究表明，西伯利亚旅鼠分离的TOP病毒与东方田鼠分离的KBR病毒S片段同源性核苷酸水平为82%，氨基酸水平为96%；与欧洲棕背分离的PUU病毒S片段同源性核苷酸水平为77%，氨基酸水平为87%。系统发生分析显示3种病毒具有共同的起源，与相应宿主动物细胞色素B基因系统发生分析结果相一致，表明3种病毒进化过程中有在宿主动物之间进行的水平传播。其中TOP病毒M、S片段3’-NCR最长，可能在3种汉坦病毒中起源最早。J.W.Song等报告韩国姬鼠来源的不同HTN病毒株，M基因324bp片段同源性95%～99%，姬鼠细胞色素B基因424bp和线粒体DNA D-环区序列差异性0%～3.1%，表明韩国不同地区姬鼠有相同的基因背景，HTN病毒具有相同的来源，在韩国没有发现HTN病毒株与其宿主动物共同发生较大变异的现象。Heiske A.等进行的系统发生分析表明，欧洲西部PUU病毒与瑞典、芬兰、俄罗斯的PUU病毒不同，同一分枝PUU病毒S片段开放读码框架基因差异性小于8%，不同分枝PUU病毒S片段开放读码框架基因差异大于14%。同一分枝PUU病毒核蛋白氨基酸序列差异0%～2%，不同分枝PUU病毒核蛋白氨基酸序列差异3%～5%。有资料表明，不同地区的欧洲棕背可以分为几个亚类，这一研究支持了PUU病毒与其宿主动物共演化的观点。L.Ivanov等对来源于俄罗斯远东地区东方田鼠的KBR病毒进行研究，结果表明不同KRB病毒株间存在0.5%～4.0%的基因差异，基因差异与捕鼠地区的关系大于与捕鼠年份的关系，表明KBR病毒与东方田鼠之间存在长期的共演化过程。
3 疫苗与抗病毒研究
近年来HFRS疫苗的研制取得了较大的进展，有些类型的疫苗已经国家批准生产使用，有的已进入临床观察中，有的正在试验室研制和检测中。中国已经研制成功并试生产的3种单价灭活疫苗经大面积人群接种观察，安全性较好，并具有较好的血清学和流行病学效果。近期(基础免疫后1年)和中期(基础免疫后2年)平均保护率，Ⅱ型地鼠苗分别为97.81%、88.73%；Ⅰ型上海沙鼠苗分别为94.08%、91.72%；Ⅰ型天元沙鼠苗均为100.00%；Ⅰ型鼠脑苗分别为88.45%、100.00%。灭活双价沙鼠肾疫苗进行的Ⅱ期临床试验，总反应率为2.5%，3针后免疫荧光抗体阳转率100.00%，中和抗体阳转率87.6%(针对Ⅰ型病毒)和96.3%(针对Ⅱ型病毒)，单一血清型阳转率100.00%，两种血清型同时阳转率75.00%。韩国生产的汉坦病毒灭活鼠脑疫苗(
