RFLP是restriction fragment length polymorphism的英文缩写，它的原理是设计一对（数对）适当的引物，使扩增片段包含某一个或数个多态性的限制性内切酶识别序列。PCR后，用该限制酶酶切PCR产物，根据电泳后酶切片段长度的变化，即可做出诊断。Owen，Fujimoto等用以PCR为基础的RFLP比较了尿至少酶基因与rRNA基因图谱的差别，提示从尿素酶基因图谱可知：众多Hp培养物是包含有多种基因亚型的Hp混合物，因此得出结论，尿素酶基因图谱完全根除所引起的可靠手段。Nancy等也报道了用RELP从一个病人体内检测出不止一种Hp菌株。
3.3 Hp分子遗传学研究
PCR还可用于细菌的基因分离，克隆，致病因子基因的序列分析等方面的研究。Courcoax等选择尿素酶C基因中的一段294bp对38例患者标本标进行PCR，扩增产物分别测序，结果所有标本在基因水平上均呈现出多态性，无一例核苷酸序列完全相同的标本，88％的标本，其DNA水平上的改变没有影响相应的氨基酸序列。认为此方法的推广应用或许能够弄清抗Hp治疗4周后再次出现的Hp究竟是复发（recrudescence）还是再次感染（reinfection）这个问题，并可用于了解Hp的传播途径。
综上所述，随着分子技术的不断发展，PCR技术在Hp研究中有很大的前途，它具有高效，特异，敏感，快速，简便等优点，标本运输条件不高，甚至可以邮寄，并可作为Hp流行病学研究的一种工具，但是PCR的高敏感性也可能是它潜在的一个致命弱点，极少Hp的DNA污染，PCR过度扩增都可导致假阳性，因此合理选择DNA扩增循环次数，实验室布局合理，操作小心谨慎，不污染样品有仔细设置对照等都是不可忽视的因素，通过这些步聚可以尽可能地克服PCR潜在的缺点，推动Hp的研究进一步深入到分子水平。
刘岱青 陆德源 张振华
上海第二医科大学（上海 200025）
