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两段法培养黑素细胞用于临床更安全

    日前,第四军医大学的西京医院全军皮肤性病中心、口腔医学院口腔组织病理学教研室及组织工程实验中心,共同完成的一项国家863计划重大专项研究证明,两段法培养黑素细胞用于临床移植时更加安全。

  1982年黑素细胞体外纯培养取得突破。1987年国外有人把培养的黑素细胞开始用于临床。利用黑素细胞培养技术,可以把少量皮肤组织扩增培养出大量黑素细胞。有人用来治疗白癜风等疾病,疗效满意,前景很好。但是由于黑素细胞常用培养基中含佛波醇酯(TPA),存在致瘤危险,影响了这种方法在临床的应用。虽然用牛垂体浸出液或者碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)代替TPA可以达到黑素细胞纯培养,但是原代培养成功率偏低,而且容易发生成纤维细胞污染。国内外临床移植黑素细胞时仍然广泛使用含TPA的培养方法。

  为探讨使用两段法培养黑素细胞,以消除TPA的致瘤危险,增加培养细胞的安全性,从而适合临床移植的需要。研究人员用两段法培养黑素细胞,他们先用含TPA培养液培养纯化黑素细胞,然后用不含TPA的培养基继续扩增传代。通过细胞形态、生长特性、细胞周期等检测观察有无TPA时培养细胞的特性。接种裸鼠检测培养细胞的致瘤性。

  结果显示,用含TPA培养液容易获得纯化的黑素细胞;扩增传代时改用不含TPA的培养基,黑素细胞由细长的多分支逐渐变成两极的宽梭形。生长速度略微减慢,细胞周期显示增殖减缓。裸鼠致瘤实验阴性。

  据研究专家介绍,目前培养黑素细胞的添加因子主要为TPA和霍乱毒素,TPA是公认的强致癌剂,在体内不易被代谢清除,把用TPA培养出的黑素细胞用于临床移植治疗时存在一定的致癌风险。两段法培养是先用含有TPA培养液纯化培养黑素细胞,获得黑素细胞的纯度100%,然后用不含TPA的培养液传代培养,细胞形态逐渐变化,反映TPA对黑素细胞的致癌影响逐渐消失,此时获得的黑素细胞更加安全。生长曲线、细胞周期、核型分析结果也印证了这个结论。因此两段法培养出的黑素细胞更加适合临床移植应用,将促进白癜风等色素性皮肤病的治疗发展。

医学频道录入:新刚    责任编辑:新刚 


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